HPV陽性是指對人乳頭瘤病毒的判斷標準,HPV陽性代表經檢測發現了感染HPV病毒。HPV是一種DNA病毒,人類是HPV唯一的宿主。HPV進入機體面板粘膜後,主要潛伏於表皮內基底細胞間,一旦時機成熟它就會致病。目前為止,科學家們已經發現了它有60多個亞型,不同的亞型導致不同的疾病。 HPV病毒檢測方法:
1、組織病理檢查:可見角化細胞和凹空細胞。準確率80-90%。
2、抗HPV衣殼抗原的免疫組織化學檢查: 用HPV免疫動物後產生的多克隆抗體查組織HPV抗原。常用過氧化物酶抗過氧化物酶方法(即PAP),顯示溼疣內的病毒蛋白,以證明疣損害中有病毒抗原。HPV蛋白陽性時,尖銳溼疣的淺表上皮細胞內可出現淡紅色的弱陽性反應。)還有PAAP、ABC法等。在空泡細胞核內見到棕褐色顆粒狀沉著為陽性;檢測率低、敏感性不高、不能分型,陽性率40-60%。
3、基因診斷: (1)聚和酶鏈反應:發展的PCR方法具有特異、敏感、簡便、快速等優點,為HPV檢測開闢了新途徑。用PCR方法檢測HPV比核酸雜交方法優越。其敏感性高,GP-PCR方法中若以凝膠電泳直接分析結果,可檢出標本中200個複製的HPVDNA,若以核酸雜交檢測PCR產物,敏感性提高,能檢出10個複製的HPVDNA。 刮板或生理鹽水浸潤的棉棒從陰道和宮頸外口取分泌物和細胞。在作細胞學檢查的同時,將標本放入5ml含有0.05%硫柳汞的PBS中,用PBS離心(3000g,10min)洗滌2次,沉積細胞重懸於1mlPBS中,取0.5ml細胞懸液抽提DNA。 PCR檢測可見特異性HPV-DNA擴增區帶。鑑於PCR技術的高度敏感性,以生殖道脫落細胞為檢材足以滿足試驗要求,避免了活檢取材、研磨組織繁雜操作。一般情況下,PCR擴增產物經凝膠電泳,觀察產生的DNA可直接作出診斷。因此,PCR技術檢測HPV實驗週期短、簡便快速。不足之處為不能定位,不知病毒是否活、死。易出現假陽性。愈後相當長的時間內可持續陽性。特異性也逐漸降低。 (2) DNA雜交法:HPVDNA分子雜交技術。如PCK法。EGFR免疫染色法。免疫染色法(熒光顯微鏡400倍可看到3個以上熒光點為陽性)。可以分型,核酸雜交可檢出HPV-DNA相關序列,PCR檢測可見特異性HPV-DNA擴增區帶。但煩瑣、昂貴。需要一定的裝置和條件
HPV陽性是指對人乳頭瘤病毒的判斷標準,HPV陽性代表經檢測發現了感染HPV病毒。HPV是一種DNA病毒,人類是HPV唯一的宿主。HPV進入機體面板粘膜後,主要潛伏於表皮內基底細胞間,一旦時機成熟它就會致病。目前為止,科學家們已經發現了它有60多個亞型,不同的亞型導致不同的疾病。 HPV病毒檢測方法:
1、組織病理檢查:可見角化細胞和凹空細胞。準確率80-90%。
2、抗HPV衣殼抗原的免疫組織化學檢查: 用HPV免疫動物後產生的多克隆抗體查組織HPV抗原。常用過氧化物酶抗過氧化物酶方法(即PAP),顯示溼疣內的病毒蛋白,以證明疣損害中有病毒抗原。HPV蛋白陽性時,尖銳溼疣的淺表上皮細胞內可出現淡紅色的弱陽性反應。)還有PAAP、ABC法等。在空泡細胞核內見到棕褐色顆粒狀沉著為陽性;檢測率低、敏感性不高、不能分型,陽性率40-60%。
3、基因診斷: (1)聚和酶鏈反應:發展的PCR方法具有特異、敏感、簡便、快速等優點,為HPV檢測開闢了新途徑。用PCR方法檢測HPV比核酸雜交方法優越。其敏感性高,GP-PCR方法中若以凝膠電泳直接分析結果,可檢出標本中200個複製的HPVDNA,若以核酸雜交檢測PCR產物,敏感性提高,能檢出10個複製的HPVDNA。 刮板或生理鹽水浸潤的棉棒從陰道和宮頸外口取分泌物和細胞。在作細胞學檢查的同時,將標本放入5ml含有0.05%硫柳汞的PBS中,用PBS離心(3000g,10min)洗滌2次,沉積細胞重懸於1mlPBS中,取0.5ml細胞懸液抽提DNA。 PCR檢測可見特異性HPV-DNA擴增區帶。鑑於PCR技術的高度敏感性,以生殖道脫落細胞為檢材足以滿足試驗要求,避免了活檢取材、研磨組織繁雜操作。一般情況下,PCR擴增產物經凝膠電泳,觀察產生的DNA可直接作出診斷。因此,PCR技術檢測HPV實驗週期短、簡便快速。不足之處為不能定位,不知病毒是否活、死。易出現假陽性。愈後相當長的時間內可持續陽性。特異性也逐漸降低。 (2) DNA雜交法:HPVDNA分子雜交技術。如PCK法。EGFR免疫染色法。免疫染色法(熒光顯微鏡400倍可看到3個以上熒光點為陽性)。可以分型,核酸雜交可檢出HPV-DNA相關序列,PCR檢測可見特異性HPV-DNA擴增區帶。但煩瑣、昂貴。需要一定的裝置和條件