斐林試劑和雙縮脲試劑區別
1、試劑的濃度和配製方法不同
斐林試劑:甲液:0.1g/mL的NaOH溶液;乙液:0.05g/mL的 溶液。
使用前臨時配製,在2mL的甲液中滴入4滴~5滴乙液,振盪使混合均勻後即可。
雙縮脲試劑:A液:0.1g/mL的NaOH溶液;B液:0.01g/mL的 溶液。
分別配製好A液和B液即可。
2、試劑的作用和鑑定原理不同
斐林試劑:
作用:可鑑定可溶性還原糖。
原理:甲液和乙液混合後產生 沉澱, 與含醛基(—CHO)的可溶性還原糖,在加熱條件下反應,將 還原為磚紅色的 沉澱。
雙縮脲試劑:
作用:可鑑定蛋白質溶液。
原理:在鹼性溶液(NaOH)中,雙縮脲( )能與 反應,形成紫色絡合物。由於蛋白質分子中含有許多與雙縮脲結構相似的肽鍵(—CO—NH—),因此,蛋白質都可以與雙縮脲試劑發生反應而使溶液呈現紫色。
3、試劑的使用方法不同
斐林試劑:使用時現配現用,要水浴加熱。如果斐林試劑放置一段時間,因 沉澱在溶液底部而無法使用。使用時,甲液和乙液不可分別加入到待測液中,否則,待測液(蘋果組織樣液)中的有機酸會中和NaOH,使產生的 不足而影響鑑定。
雙縮脲試劑:使用時,雙縮脲試劑A液和雙縮脲試劑B液要分別先後加入到待測液中,不需要加熱。雙縮脲試劑A液和雙縮脲試劑B液不可以混合後再加入待測液。如先混合,則會產生 沉澱而無 產生。加入的雙縮脲試劑B液( )也不能過量,否則藍色的 會遮蓋產生的紫色。
4、反應中出現的顏色不同
斐林試劑鑑定可溶性還原糖,出現的顏色變化為:淺藍色→棕色→磚紅色。
待測液加入剛配製的斐林試劑,溶液是淺藍色;水浴加熱後,一部分 被還原為磚紅色的 ,溶液呈現兩種顏色的混合色——棕色;隨著反應的完成, 全部被還原為 ,溶液呈磚紅色。
雙縮脲試劑鑑定蛋白質,出現的顏色變化為:無色→淺藍色→紫色。
加入雙縮脲試劑A液,溶液無色;再加入雙縮脲試劑B液,有 形成,溶液呈淺藍色;振盪均勻後,反應完成,溶液呈紫色
斐林試劑和雙縮脲試劑區別
1、試劑的濃度和配製方法不同
斐林試劑:甲液:0.1g/mL的NaOH溶液;乙液:0.05g/mL的 溶液。
使用前臨時配製,在2mL的甲液中滴入4滴~5滴乙液,振盪使混合均勻後即可。
雙縮脲試劑:A液:0.1g/mL的NaOH溶液;B液:0.01g/mL的 溶液。
分別配製好A液和B液即可。
2、試劑的作用和鑑定原理不同
斐林試劑:
作用:可鑑定可溶性還原糖。
原理:甲液和乙液混合後產生 沉澱, 與含醛基(—CHO)的可溶性還原糖,在加熱條件下反應,將 還原為磚紅色的 沉澱。
雙縮脲試劑:
作用:可鑑定蛋白質溶液。
原理:在鹼性溶液(NaOH)中,雙縮脲( )能與 反應,形成紫色絡合物。由於蛋白質分子中含有許多與雙縮脲結構相似的肽鍵(—CO—NH—),因此,蛋白質都可以與雙縮脲試劑發生反應而使溶液呈現紫色。
3、試劑的使用方法不同
斐林試劑:使用時現配現用,要水浴加熱。如果斐林試劑放置一段時間,因 沉澱在溶液底部而無法使用。使用時,甲液和乙液不可分別加入到待測液中,否則,待測液(蘋果組織樣液)中的有機酸會中和NaOH,使產生的 不足而影響鑑定。
雙縮脲試劑:使用時,雙縮脲試劑A液和雙縮脲試劑B液要分別先後加入到待測液中,不需要加熱。雙縮脲試劑A液和雙縮脲試劑B液不可以混合後再加入待測液。如先混合,則會產生 沉澱而無 產生。加入的雙縮脲試劑B液( )也不能過量,否則藍色的 會遮蓋產生的紫色。
4、反應中出現的顏色不同
斐林試劑鑑定可溶性還原糖,出現的顏色變化為:淺藍色→棕色→磚紅色。
待測液加入剛配製的斐林試劑,溶液是淺藍色;水浴加熱後,一部分 被還原為磚紅色的 ,溶液呈現兩種顏色的混合色——棕色;隨著反應的完成, 全部被還原為 ,溶液呈磚紅色。
雙縮脲試劑鑑定蛋白質,出現的顏色變化為:無色→淺藍色→紫色。
加入雙縮脲試劑A液,溶液無色;再加入雙縮脲試劑B液,有 形成,溶液呈淺藍色;振盪均勻後,反應完成,溶液呈紫色