2 儀器與用具
2.1 恆溫培養箱,高壓滅菌器應檢定合格，且在使用有效期內。
2.2 培養基：胰酪大豆腖瓊脂培養基（TSA)，配製詳見《培養基配製操作規程》（SOP-QC-0060）。
2.3 培養皿φ55mm。
2.4 一次性醫用棉籤、生理鹽水、三角瓶、滅菌剪刀
3 測試條件
3.1 如使用自制培養基平板，在測定前培養皿表面必須嚴格消毒。
3.2 如使用市售預製平板，則每進入一級潔淨區，即脫掉一層包裝袋，測試所用培養皿最終以無菌狀態進入所測定區域。
3.3 測定狀態分為靜態和動態，靜態測試時室內測定人員一般不超過2人，測試人員必須穿戴符合環境潔淨度級別的工作服。
3.4 對單向流測定應在淨化空氣調節系統正常執行時間不少於10min之後開始；對非單向流測定應在淨化空氣調節系統正常執行時間不少於30min之後開始。
4 表面微生物測試點選擇及測試頻度
4.1 取樣點數目及其佈置應根據以下幾個方便設定：
空調系統初始驗證的結果；房間（或區域）的大小和佈局；房間（或區域）的用途；與暴露產品的距離；人流物流方向；裝置、管理等的複雜程度；易受汙染的部位等；
應考慮包含以下部位：每扇門、每個門把手、地板（至少兩點）、牆壁（不易被清潔、消毒的部位，至少兩點）、公共介質的管路（不易被清潔、消毒部位）、生產裝置的關鍵性部位（如灌裝針、易與人員接觸的塑膠簾膜、膠塞筒、傳輸帶）等。
操作人員人體表面取樣點應考慮以下部位:雙手手指及掌內側、雙手前臂、前胸或腹、眼鏡、前額、口罩等處。
根據潔淨區內設施、裝置等表面對產品和潔淨室環境的影響程度，通常將表面分為三類：關鍵表面（產品、容器及密封件的表面）、一般表面（如裝置的外表面、牆壁等）和地面，並且分別設定不同的微生物限度要求。
4.2 取樣次數
一般來說，對於同一潔淨區或區域，每個相同的取樣物體應在其不同的地方採2個樣。如牆面2個取樣點，地面2個取樣點，潔淨區主要裝置2個取樣點等。
表面微生物的每點取樣點面積宜控制在25cm2左右。
4.3 測試頻度
潔淨區表面微生物測試的頻率見表1。
表1 測試頻率
4.4 日常監測取樣點和頻度見 潔淨室（區）環境監測管理規程（SOP-QC-0095 01）。
5 測試方法
5.1 接觸平皿法
5.1.1 接觸平皿法適用於平整表面。
5.1.2取樣前仔細檢查每個培養皿的質量，如發現變質、破損或汙染的應剔除。
5.1.3 在培養皿上蓋標記測定專案、測定點，日期等資訊。
5.1.4 表面附著菌
5.1.4.1 開啟接觸板碟蓋，讓培養基表面與取樣面直接接觸，均勻按壓接觸板底板，確保培養基表面與取樣點表面充分接觸不少於10秒，再蓋上碟蓋。
5.1.4.2 取樣後，立即用75%乙醇擦拭取樣表面。
5.1.5 手套附著菌
5.1.5.1 開啟接觸板碟蓋，操作者併攏五指，將雙手指面與培養基表面均勻充分接觸不少於10秒，再蓋上碟蓋。
5.1.6 取樣後的接觸板置於培養箱中，先30～35℃培養不少於3天，再20~25℃培養不少於2天。
5.2 棉籤擦拭法
5.2.1 棉籤擦拭法適用於非平整表面。
5.2.2 取100ml生理鹽水放入250ml三角瓶中作為浸出液，取300ml生理鹽水放入500ml三角瓶中作為洗淨液，取400ml生理鹽水放入500ml三角瓶中作為空白液，121℃15分鐘滅菌。
5.2.3 在三角瓶上標記測定點、日期等資訊。
5.2.4 取出一次性棉籤，握住棉籤柄，用浸出液浸溼棉頭，以約30度角與取樣表面接觸，擦拭面積為5cm×5cm，緩慢縱橫互動擦拭3遍。
5.2.5 擦拭完畢，用已滅菌剪刀剪斷棉籤，棉頭裝入100ml浸出液的三角瓶內，手持一端廢棄。
5.2.6 取樣後，立即用75%乙醇擦拭取樣表面。
5.2.7 將上述取樣後的三角瓶振搖2分鐘，每分鐘振搖120次，在超淨工作臺內透過過濾裝置，將100ml浸出液全部過濾。浸出液過濾完畢，用洗淨液300ml分三次沖洗過濾器，將過濾後的濾膜放入培養基平板內。用400ml空白液進行過濾，做為空白。
5.2.8 將樣品培養基平板和空白樣培養基平板倒置在培養箱中，先30~35℃培養不少於3天，再20~25℃培養不少於2天。
2 儀器與用具
2.1 恆溫培養箱,高壓滅菌器應檢定合格，且在使用有效期內。
2.2 培養基：胰酪大豆腖瓊脂培養基（TSA)，配製詳見《培養基配製操作規程》（SOP-QC-0060）。
2.3 培養皿φ55mm。
2.4 一次性醫用棉籤、生理鹽水、三角瓶、滅菌剪刀
3 測試條件
3.1 如使用自制培養基平板，在測定前培養皿表面必須嚴格消毒。
3.2 如使用市售預製平板，則每進入一級潔淨區，即脫掉一層包裝袋，測試所用培養皿最終以無菌狀態進入所測定區域。
3.3 測定狀態分為靜態和動態，靜態測試時室內測定人員一般不超過2人，測試人員必須穿戴符合環境潔淨度級別的工作服。
3.4 對單向流測定應在淨化空氣調節系統正常執行時間不少於10min之後開始；對非單向流測定應在淨化空氣調節系統正常執行時間不少於30min之後開始。
4 表面微生物測試點選擇及測試頻度
4.1 取樣點數目及其佈置應根據以下幾個方便設定：
空調系統初始驗證的結果；房間（或區域）的大小和佈局；房間（或區域）的用途；與暴露產品的距離；人流物流方向；裝置、管理等的複雜程度；易受汙染的部位等；
應考慮包含以下部位：每扇門、每個門把手、地板（至少兩點）、牆壁（不易被清潔、消毒的部位，至少兩點）、公共介質的管路（不易被清潔、消毒部位）、生產裝置的關鍵性部位（如灌裝針、易與人員接觸的塑膠簾膜、膠塞筒、傳輸帶）等。
操作人員人體表面取樣點應考慮以下部位:雙手手指及掌內側、雙手前臂、前胸或腹、眼鏡、前額、口罩等處。
根據潔淨區內設施、裝置等表面對產品和潔淨室環境的影響程度，通常將表面分為三類：關鍵表面（產品、容器及密封件的表面）、一般表面（如裝置的外表面、牆壁等）和地面，並且分別設定不同的微生物限度要求。
4.2 取樣次數
一般來說，對於同一潔淨區或區域，每個相同的取樣物體應在其不同的地方採2個樣。如牆面2個取樣點，地面2個取樣點，潔淨區主要裝置2個取樣點等。
表面微生物的每點取樣點面積宜控制在25cm2左右。
4.3 測試頻度
潔淨區表面微生物測試的頻率見表1。
表1 測試頻率
4.4 日常監測取樣點和頻度見 潔淨室（區）環境監測管理規程（SOP-QC-0095 01）。
5 測試方法
5.1 接觸平皿法
5.1.1 接觸平皿法適用於平整表面。
5.1.2取樣前仔細檢查每個培養皿的質量，如發現變質、破損或汙染的應剔除。
5.1.3 在培養皿上蓋標記測定專案、測定點，日期等資訊。
5.1.4 表面附著菌
5.1.4.1 開啟接觸板碟蓋，讓培養基表面與取樣面直接接觸，均勻按壓接觸板底板，確保培養基表面與取樣點表面充分接觸不少於10秒，再蓋上碟蓋。
5.1.4.2 取樣後，立即用75%乙醇擦拭取樣表面。
5.1.5 手套附著菌
5.1.5.1 開啟接觸板碟蓋，操作者併攏五指，將雙手指面與培養基表面均勻充分接觸不少於10秒，再蓋上碟蓋。
5.1.6 取樣後的接觸板置於培養箱中，先30～35℃培養不少於3天，再20~25℃培養不少於2天。
5.2 棉籤擦拭法
5.2.1 棉籤擦拭法適用於非平整表面。
5.2.2 取100ml生理鹽水放入250ml三角瓶中作為浸出液，取300ml生理鹽水放入500ml三角瓶中作為洗淨液，取400ml生理鹽水放入500ml三角瓶中作為空白液，121℃15分鐘滅菌。
5.2.3 在三角瓶上標記測定點、日期等資訊。
5.2.4 取出一次性棉籤，握住棉籤柄，用浸出液浸溼棉頭，以約30度角與取樣表面接觸，擦拭面積為5cm×5cm，緩慢縱橫互動擦拭3遍。
5.2.5 擦拭完畢，用已滅菌剪刀剪斷棉籤，棉頭裝入100ml浸出液的三角瓶內，手持一端廢棄。
5.2.6 取樣後，立即用75%乙醇擦拭取樣表面。
5.2.7 將上述取樣後的三角瓶振搖2分鐘，每分鐘振搖120次，在超淨工作臺內透過過濾裝置，將100ml浸出液全部過濾。浸出液過濾完畢，用洗淨液300ml分三次沖洗過濾器，將過濾後的濾膜放入培養基平板內。用400ml空白液進行過濾，做為空白。
5.2.8 將樣品培養基平板和空白樣培養基平板倒置在培養箱中，先30~35℃培養不少於3天，再20~25℃培養不少於2天。