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    磷酸緩衝液也叫做磷酸鹽緩衝液,英文名為Phosphate Buffer,是生物化學研究中使用zui為廣泛的一種緩衝液,磷酸緩衝液的配製我們一起來了解一下。首先,按照下表所給定的體積,混合1 mol/L 的磷酸二氫鈉(單鹼)和1mol/L 磷酸氫二鈉(雙鹼)貯液,獲得所需pH的磷酸緩衝液。

    配製1 mol/L 的磷酸二氫鈉(NaH2PO4?H2O)貯液:溶解138g於足量水中,使終體積為1L;1mol/L 磷酸氫二鈉(Na2HPO4)貯液:溶解142g於足量水中使終體積為1L。

    1mol/L 磷酸二氫鈉(ml) lmol/L 磷酸氫二鈉(ml) zui終pH值

    877 133 6.0

    850 150 6.1

    815 185 6.2

    775 225 6.3

    735 265 6.4

    685 315 6.5

    625 375 6.6

    565 435 6.7

    510 490 6.8

    450 550 6.9

    390 610 7.0

    330 670 7.1

    280 720 7.2

    0.1mol/L是在1L水中含有的磷酸鹽物質的總摩爾。 用磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉做緩衝液其濃度為: 磷酸氫二鈉20.7472g/L; 磷酸二氫鈉3.1167g/L。即若配製100mL,則在100ml水中加入2.0747g磷酸氫二鈉和0.3117g磷酸二氫鈉。

    通常使用的磷酸鈉緩衝液有磷酸鈉緩衝液(NaH2PO4&Na2HPO4)和磷酸鉀緩衝液 (K2HPO4&KH2PO4),由於它們有二級解離,緩衝的pH值範圍很廣。那麼,各種PH值的磷酸鹽緩衝液如何配置?

    各種PH值的磷酸鹽緩衝液的配製

    磷酸鹽緩衝液

    取磷酸二氫鈉38.0g,與磷酸氫二鈉5.04g,加水使成1000ml,即得。

    磷酸鹽緩衝液(pH2.0)

    甲液:取磷酸16.6ml,加水至1000ml,搖勻。乙液:取磷酸氫二鈉71.63g,加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml與乙液27.5ml混合,搖勻,即得。

    磷酸鹽緩衝液(pH2.5)

    取磷酸二氫鉀100g,加水800ml,用鹽酸調節pH至2.5,用水稀釋至1000ml。

    磷酸鹽緩衝液(pH5.0)

    取0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液一定量,用氫氧化鈉試液調節pH值至5.0,即得。

    磷酸鹽緩衝液(pH5.8)

    取磷酸二氫鉀8.34g與磷酸氫二鉀0.87g,加水使溶解成1000ml,即得。

    磷酸鹽緩衝液(pH6.5)

    取磷酸二氫鉀0.68g,加0.1mol/L氫氧化鈉溶液15.2ml,用水稀釋至100ml,即得。

    磷酸鹽緩衝液(pH6.6)

    取磷酸二氫鈉1.74g、磷酸氫二鈉2.7g與氯化鈉1.7g,加水使溶解成400ml,即得。

    磷酸鹽緩衝液(含胰酶)(pH6.8)

    取磷酸二氫鉀6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氫氧化鈉溶液調節pH值至6.8;另取胰酶10g,加水適量使溶解,將兩液混合後,加水稀釋至1000ml,即得。

    磷酸鹽緩衝液(pH6.8)

    取0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液250ml,加0.2mol/L氫氧化鈉溶液118ml,用水稀釋至1000ml,搖勻,即得。

    磷酸鹽緩衝液(pH7.0)

    取磷酸二氫鉀0.68g,加0.1mol/L氫氧化鈉溶液29.1ml,用水稀釋至100ml,即得。

    磷酸鹽緩衝液(pH7.2)

    取0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液50ml與0.2mol/L氫氧化鈉溶液35ml,加新沸過的冷水稀釋至200ml,搖勻,即得。 磷酸鹽緩衝液(pH7.3)

    取磷酸氫二鈉1.9734g與磷酸二氫鉀0.2245g,加水使溶解成1000ml,調節pH值至7.3,即得。

    磷酸鹽緩衝液(pH7.4)

    取磷酸二氫鉀1.36g, 加0.1mol/L氫氧化鈉溶液79ml,用水稀釋至200ml,即得。

    磷酸鹽緩衝液(pH7.6)

    取磷酸二氫鉀27.22g,加水使溶解成1000ml,取50ml,加0.2mol/L氫氧化鈉溶液42.4ml,再加水稀釋至200ml,即得。

    磷酸鹽緩衝液(pH7.8)

    甲液:取磷酸氫二鈉35.9g,加水溶解,並稀釋至500ml。

    乙液:取磷酸二氫鈉2.76g,加水溶解,並稀釋至100ml。取上述甲液91.5ml與乙液8.5ml混合,搖勻,即得。

    磷酸鹽緩衝液(pH7.8~8.0)

    取磷酸氫二鉀5.59g與磷酸二氫鉀0.41g,加水使溶解成1000ml,即得。

    上文就是對磷酸緩衝液的配製的介紹,磷酸緩衝液易配製各種濃度的緩衝液,而且適用的pH值範圍寬,可配置各種pH值的緩衝液,同時pH受溫度影響較小,還具有較強的緩衝能力緩衝液被稀釋後pH變化小。

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