培養基的滅菌方法
1、高壓蒸汽滅菌:
高壓蒸汽滅菌適合於耐高溫培養基、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養基在愛製備過程中混入各種雜菌,分裝後應立即滅菌,至少應在24h內完成滅菌工作。滅菌時一般是在0.105MPa壓力下,溫度121℃時,滅菌15~30min即可。消毒時間不宜過長,也不能超過規定的壓力範圍,否則有機物質特別是維生素類物質就會在高溫下分解,失去營養作用,也會使培養基變質、變色,甚至難以凝固。將蒸餾水或自來水裝在三角瓶中,裝水量一般不超過瓶的2/3,用牛皮紙或硫酸紙包紮封口,然後放入高壓鍋中滅菌後即為無菌水。 滅菌後的培養基可放到培養室中預培養3d,若無汙染現象,則證明滅菌是徹底的,可以使用。暫時不用的培養基最好置於10℃下儲存。含IAA或GA3的培養基應在1周內用完,其他培養基最多也不要超過1個月。
2、過濾滅菌:
一些植物生長調節劑及有機物,如IAA、GA3、ZT、CM等,遇熱容易分解,不能與培養基一起進行高溫滅菌,而要使用細菌過濾器濾去其中的雜菌。細菌過濾器與濾膜(孔徑0.45微米)使用之前要先進行高壓滅菌。過濾後的溶液要立即加入培養基中,若為液體培養基,可在培養基冷卻至30℃時加入;若為固體培養基,必須在培養基凝固之前(50-60℃)加入,振盪使溶液與其他成分混合均勻。
擴充套件資料:培養基有哪些種類
培養基按其組成物質的純度、狀態、用途可分為三大型別。按純度 合成培養基 是指原料其化學成分明確、穩定的培養基。適合於研究菌種基本代謝和過程的物質變化規律,但是培養基營養單一,價格較高,不適合用於大規模工業生產。 天然培養基 這一類培養基採用天然的原料,所以其原料來源豐富(大多為農副產品)、價格低廉、適於工業。然而原料質量等方面不加控制會影響生產的穩定性。按狀態 固體培養基 適合於菌種和孢子的培養和儲存,也廣泛應用於有子實體的真菌類,如香菇、白木耳等的生產。 半固體培養基 在配好的液體培養基中加入少量的瓊脂,一般用量為0.5%~0.8%,主要用於微生物的鑑定。 液體培養基 80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養成分,是發酵工業大規模使用的培養基。按用途 培養基按其用途可分為孢子(斜面)培養基、種子培養基和發酵培養基三種。
培養基的滅菌方法
1、高壓蒸汽滅菌:
高壓蒸汽滅菌適合於耐高溫培養基、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養基在愛製備過程中混入各種雜菌,分裝後應立即滅菌,至少應在24h內完成滅菌工作。滅菌時一般是在0.105MPa壓力下,溫度121℃時,滅菌15~30min即可。消毒時間不宜過長,也不能超過規定的壓力範圍,否則有機物質特別是維生素類物質就會在高溫下分解,失去營養作用,也會使培養基變質、變色,甚至難以凝固。將蒸餾水或自來水裝在三角瓶中,裝水量一般不超過瓶的2/3,用牛皮紙或硫酸紙包紮封口,然後放入高壓鍋中滅菌後即為無菌水。 滅菌後的培養基可放到培養室中預培養3d,若無汙染現象,則證明滅菌是徹底的,可以使用。暫時不用的培養基最好置於10℃下儲存。含IAA或GA3的培養基應在1周內用完,其他培養基最多也不要超過1個月。
2、過濾滅菌:
一些植物生長調節劑及有機物,如IAA、GA3、ZT、CM等,遇熱容易分解,不能與培養基一起進行高溫滅菌,而要使用細菌過濾器濾去其中的雜菌。細菌過濾器與濾膜(孔徑0.45微米)使用之前要先進行高壓滅菌。過濾後的溶液要立即加入培養基中,若為液體培養基,可在培養基冷卻至30℃時加入;若為固體培養基,必須在培養基凝固之前(50-60℃)加入,振盪使溶液與其他成分混合均勻。
擴充套件資料:培養基有哪些種類
培養基按其組成物質的純度、狀態、用途可分為三大型別。按純度 合成培養基 是指原料其化學成分明確、穩定的培養基。適合於研究菌種基本代謝和過程的物質變化規律,但是培養基營養單一,價格較高,不適合用於大規模工業生產。 天然培養基 這一類培養基採用天然的原料,所以其原料來源豐富(大多為農副產品)、價格低廉、適於工業。然而原料質量等方面不加控制會影響生產的穩定性。按狀態 固體培養基 適合於菌種和孢子的培養和儲存,也廣泛應用於有子實體的真菌類,如香菇、白木耳等的生產。 半固體培養基 在配好的液體培養基中加入少量的瓊脂,一般用量為0.5%~0.8%,主要用於微生物的鑑定。 液體培養基 80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養成分,是發酵工業大規模使用的培養基。按用途 培養基按其用途可分為孢子(斜面)培養基、種子培養基和發酵培養基三種。