乳糖不耐受的診斷應該是沒有損傷性、無毒無害操作簡便的，目前適用的主要：氫氣呼氣試驗、大便常規化驗和還原糖測定以及尿檢試驗。1、氫氣呼氣實驗：

方法：口服1-2g.kg-1 乳糖3h後測定呼氣中氫氣濃度，與空腹水平比較升高＞2×10-5 mol.L-1 判定為吸收不良。

優點：藉助專門的氣壓測試儀測定氫氣濃度，準確率高；操作無損傷。

缺點：操作時間長達4h，需要受試者很好的配合，不適於小兒乳糖不耐受診斷。

方法1：大便塗片顯微鏡下常規檢查陰性。採用醋酸鉛氫氧化銨法，化驗結果還原糖≥（++）為陽性，同時檢查糞PH＜5.5。如乳糖陰性，但PH低，結合病史仍提示乳糖不耐受症的可能。

方法2：班氏試劑法原理相同，評定標準為還原糖≥（++）為陽性，不需要配合PH值測定。

優點：操作簡便，具有較高的靈敏度，可以分辨原發性和繼發性乳糖不耐受。

缺點：需要排除葡萄糖、半乳糖、果糖等糖類的干擾。

方法：按每公斤體重10ml奶液計算，排空尿液後，飲奶，飲奶後2小時禁食禁水，排去飲奶後第一小時尿液，檢測飲奶後第二小時尿液。顯色結束後，樣品孔與標準孔對比，比標準孔顯色深為陰性，顯色淺為陽性，提示乳糖不耐受。

優點：取樣簡單、操作簡便，特異性和靈敏度較高。

缺點：大部分操作由家長完成，降低了準確度，飲食（VC）、藥物影響檢測結果。

方法：分別測定空腹和口服乳糖（0.5-1g/kg）後0.5h、1h的血糖，血糖低於200mg.L-1，提示乳糖不耐受。

缺點：該法需多次取血，假陽性率高，特異性差。