取動物胚胎或幼齡動物器官、組織。將材料剪碎,並用胰蛋白酶(或用膠原蛋白酶)處理(消化),形成分散的單個細胞,將處理後的細胞移入培養基中配成一定濃度的細胞懸浮液。懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上,當貼壁細胞分裂生長到互相接觸時,細胞就會停止分裂增殖,出現接觸抑制。此時需要將出現接觸抑制的細胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細胞懸浮液。另外,原代培養就是從機體取出後立即進行的細胞、組織培養。當細胞從動植物中生長遷移出來,形成生長暈並增大以後,科學家接著進行傳代培養,即將原代培養細胞分成若干份,接種到若干份培養基中,使其繼續生長、增殖。透過一定的選擇或純化方法,從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質。培養條件:
1、無菌、無毒的環境:對培養液和所有培養用具進行無菌處理,通常還要在培養液中加入一定量的的抗生素,以防被汙染。此外應定期更換培養液,以便清除代謝產物防止細胞代謝產物累積對細胞自身產生危害。
2、營養物質:無機物(無機鹽、微量元素等),有機物(糖、氨基酸、促生長因子等)。
3、血清和血漿 。(提供細胞生長必須的營養成份)4、溫度和pH。(36.5±0.5℃,7.2~7.4)5、氣體環境。(95%的空氣+5%CO₂的混合氣體)擴充套件資料:動物細胞有細胞核、細胞質和細胞膜,沒有細胞壁,液泡不明顯,含有溶酶體,動物細胞的結構有細胞膜、細胞質、細胞器、細胞核;它們的主要作用是控制細胞的進出、進行物質轉換、生命活動的主要場所、控制細胞的生命活動。細胞內部有細胞器:細胞核,雙層膜,包含有由DNA和蛋白質構成的染色體。內質網分為粗麵的與滑面的,粗麵內質網表面附有核糖體,參與蛋白質的合成和加工;光面內質網,表面沒有核糖體,參與脂類合成。植物細胞與動物細胞區別:1、培養基不同:植物細胞(固體培養基),動物細胞(液體培養基)。2、培養基的成分不同:動物細胞培養必須利用動物血清,植物組織培養則不需要,而需要加入植物生長素。3、產物不同:植物組織培養最後一般得到新的植物個體,而動物細胞培養因為動物體細胞一般不能表達其全能性,因此得到的是隻含同一種的細胞的一個細胞系(或者叫細胞群)。
4、原理不同:植物組織培養的原理為植物細胞的全能性,動物細胞培養的原理為細胞的增殖分化。
5、過程不同:植物組織培養的過程為脫分化和再分化,動物細胞培養的過程為原代培養和傳代培養。
取動物胚胎或幼齡動物器官、組織。將材料剪碎,並用胰蛋白酶(或用膠原蛋白酶)處理(消化),形成分散的單個細胞,將處理後的細胞移入培養基中配成一定濃度的細胞懸浮液。懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上,當貼壁細胞分裂生長到互相接觸時,細胞就會停止分裂增殖,出現接觸抑制。此時需要將出現接觸抑制的細胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細胞懸浮液。另外,原代培養就是從機體取出後立即進行的細胞、組織培養。當細胞從動植物中生長遷移出來,形成生長暈並增大以後,科學家接著進行傳代培養,即將原代培養細胞分成若干份,接種到若干份培養基中,使其繼續生長、增殖。透過一定的選擇或純化方法,從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質。培養條件:
1、無菌、無毒的環境:對培養液和所有培養用具進行無菌處理,通常還要在培養液中加入一定量的的抗生素,以防被汙染。此外應定期更換培養液,以便清除代謝產物防止細胞代謝產物累積對細胞自身產生危害。
2、營養物質:無機物(無機鹽、微量元素等),有機物(糖、氨基酸、促生長因子等)。
3、血清和血漿 。(提供細胞生長必須的營養成份)4、溫度和pH。(36.5±0.5℃,7.2~7.4)5、氣體環境。(95%的空氣+5%CO₂的混合氣體)擴充套件資料:動物細胞有細胞核、細胞質和細胞膜,沒有細胞壁,液泡不明顯,含有溶酶體,動物細胞的結構有細胞膜、細胞質、細胞器、細胞核;它們的主要作用是控制細胞的進出、進行物質轉換、生命活動的主要場所、控制細胞的生命活動。細胞內部有細胞器:細胞核,雙層膜,包含有由DNA和蛋白質構成的染色體。內質網分為粗麵的與滑面的,粗麵內質網表面附有核糖體,參與蛋白質的合成和加工;光面內質網,表面沒有核糖體,參與脂類合成。植物細胞與動物細胞區別:1、培養基不同:植物細胞(固體培養基),動物細胞(液體培養基)。2、培養基的成分不同:動物細胞培養必須利用動物血清,植物組織培養則不需要,而需要加入植物生長素。3、產物不同:植物組織培養最後一般得到新的植物個體,而動物細胞培養因為動物體細胞一般不能表達其全能性,因此得到的是隻含同一種的細胞的一個細胞系(或者叫細胞群)。
4、原理不同:植物組織培養的原理為植物細胞的全能性,動物細胞培養的原理為細胞的增殖分化。
5、過程不同:植物組織培養的過程為脫分化和再分化,動物細胞培養的過程為原代培養和傳代培養。