HAT培養基篩選方法基本原理：
1. HAT培養基成分：含有次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶(T)三種成分。
2. 細胞DNA合成途徑：主要合成和補救合成途徑兩種方式。主要合成就是利用糖和氨基酸在二氫葉酸還原酶的催化下來合成DNA；而補救合成途徑則是透過次嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶(Hypoxanthine guznine phosphoribosyl transferase， HGPRT)和胸腺嘧啶激酶(thymidine kinase，TK)將核苷酸前體合成核苷酸以供DNA合成原料。
3. HAT培養基中氯基喋呤是二氫葉酸還原酶的抑制劑，能有效地阻斷DNA合成的內源性途徑。融合前的骨髓瘤細胞不能產生抗體，並且缺乏次黃嘌呤 – 鳥嘌呤磷酸核糖基轉移酶（HGPRT）基因，使得它們對HAT培養基敏感，阻斷了DNA補救合成途徑。
4. 將融合的細胞在HAT培養基中孵育大約10至14天，未融合的以及自身融合的骨髓瘤細胞死亡。這是因為HAT培養基阻斷了骨髓瘤細胞兩大DNA合成途徑。未融合的以及自身融合的B淋巴細胞雖然能夠合成HGPRT酶，但其是正常細胞，存活一段時間（最多兩週）也死亡。因此，在HAT養基中，只有B細胞-骨髓瘤雜合體存活，因為雜交瘤細胞繼承了B淋巴細胞和骨髓瘤細胞的雙重特性，能夠合成HGPRT酶和TK酶。這些雜交瘤細胞能夠分泌抗體（B細胞特性）並且無限增殖（骨髓瘤細胞特性）。
5. 然後將培養基稀釋到多孔板中，使得每個孔僅含有一個雜交瘤細胞。再由這些單細胞克隆生長，最終選出分泌預定特異抗體的雜交細胞株。由於孔中的抗體由相同的B細胞產生，針對相同的抗原表位，所以產生的抗體又被稱之為單克隆抗體。
6. 接下來採用體內或者體外方式對篩選的能分泌特異性抗體的雜交瘤細胞進行擴大培養，最後收集提純獲取單抗。
HAT培養基篩選方法基本原理：
1. HAT培養基成分：含有次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶(T)三種成分。
2. 細胞DNA合成途徑：主要合成和補救合成途徑兩種方式。主要合成就是利用糖和氨基酸在二氫葉酸還原酶的催化下來合成DNA；而補救合成途徑則是透過次嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶(Hypoxanthine guznine phosphoribosyl transferase， HGPRT)和胸腺嘧啶激酶(thymidine kinase，TK)將核苷酸前體合成核苷酸以供DNA合成原料。
3. HAT培養基中氯基喋呤是二氫葉酸還原酶的抑制劑，能有效地阻斷DNA合成的內源性途徑。融合前的骨髓瘤細胞不能產生抗體，並且缺乏次黃嘌呤 – 鳥嘌呤磷酸核糖基轉移酶（HGPRT）基因，使得它們對HAT培養基敏感，阻斷了DNA補救合成途徑。
4. 將融合的細胞在HAT培養基中孵育大約10至14天，未融合的以及自身融合的骨髓瘤細胞死亡。這是因為HAT培養基阻斷了骨髓瘤細胞兩大DNA合成途徑。未融合的以及自身融合的B淋巴細胞雖然能夠合成HGPRT酶，但其是正常細胞，存活一段時間（最多兩週）也死亡。因此，在HAT養基中，只有B細胞-骨髓瘤雜合體存活，因為雜交瘤細胞繼承了B淋巴細胞和骨髓瘤細胞的雙重特性，能夠合成HGPRT酶和TK酶。這些雜交瘤細胞能夠分泌抗體（B細胞特性）並且無限增殖（骨髓瘤細胞特性）。
5. 然後將培養基稀釋到多孔板中，使得每個孔僅含有一個雜交瘤細胞。再由這些單細胞克隆生長，最終選出分泌預定特異抗體的雜交細胞株。由於孔中的抗體由相同的B細胞產生，針對相同的抗原表位，所以產生的抗體又被稱之為單克隆抗體。
6. 接下來採用體內或者體外方式對篩選的能分泌特異性抗體的雜交瘤細胞進行擴大培養，最後收集提純獲取單抗。