一、區別

1、原理不同

分光光度法的原理基於朗伯一比爾（Lambert - Beer）定律，在分光光度計中，將不同波長的光連續地照射到一定濃度的樣品溶液時，便可得到與不同波長相對應的吸收強度。利用該曲線進行物質定性、定量的分析方法。

比色法的原理是基於被測物質溶液的顏色或加入顯色劑後生成的有色溶液的顏色，顏色深度和物質含量成正比，則根據光被有色溶液吸收的強度，即可測定溶液中物質的含量。

2、特點不同

分光光度法具有靈敏度高、操作簡便、快速等優點，是生物化學實驗中最常用的實驗方法。而比色法以生成有色化合物的顯色反應為基礎，針對性強，使用條件較為嚴格：反應應具有較高的靈敏度和選擇性，反應生成的有色化合物的組成恆定且較穩定，它和顯色劑的顏色差別較大。

3、歷史發展不同

比色法的歷史比分光光度法悠久。早在公元初古希臘人就曾用五倍子溶液測定醋中的鐵，1795年，俄華人也用五倍子的酒精溶液測定礦泉水中的鐵。比色法作為一種定量分析的方法，大約開始於19世紀30～40年代。而分光光度法是現代社會普遍使用的一種測定物質含量的方法。

隨著光學儀器製造技術的發展，紫外－可見分光光度計應用日益普及，精密度較高而價格又較低的紫外－可見分光光度計已逐漸代替光電比色計，分光光度法也隨之逐漸代替了比色法。