反相鍵合相色譜法
典型的反相鍵合色譜法是用非極性固定相和極性流動相組成的色譜體系。固定相，常用十八烷基（ODS或C）鍵合相；流動相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相色譜系統，用弱極性或中等極性的鍵合相和極性大於固定相的流動相組成。
(1) 分離機制 反相鍵合相表面具有非極性烷基官能團，及未被取代的矽醇基。矽醇基具有吸附效能，剩餘矽醇基的多寡，視覆蓋率而定。簡要介紹疏溶劑理論。
疏溶劑理論：當一個非極性溶質或溶質分子中的非極性部分與極性溶劑相接觸時，相互產生斥力，自由能（G）增加，熵減小，不穩定性增加。根據熱力學第二定律，系統由不穩定到穩定是自發的，即熵增加是自發的。因此，為了彌補熵的損失，溶質分子中非極性部分結構的取向，將導致在極性溶劑中形成一個“容腔”，這種效應稱為疏溶劑或疏水效應。該理論認為，在鍵合相反相色譜法中溶質的保留主要不是由於溶質分子與鍵合相間的色散力，而是溶質分子與極性溶劑分子間的排斥力，促使溶質分子與鍵合相的烴基發生疏水締合，且締合反應是可逆的。容量因子k與自由能變化△G的關係如下式：
lnk＝lnV/V－△G/RT (8·5)
上式中的R為理想氣體常數、T為熱力學溫度、V是色譜柱中鍵合相表面所鍵合的官能團的體積，V是色譜柱中流動相的體積。該式說明△G越大，被分離組分的k越小，保留時間越短。
(3) 特點 反相色譜法是應用最廣的色譜法，主要用於分離非極性至中等極性的各類分子型化合物，因為鍵合相表面的官能團不流失，溶劑的極性可以在很大範圍內調整，因此應用範圍很寬。由它派生的反相離子對色譜法與離子抑制色譜法，可以分離有機酸、鹼、鹽等離子型化合物。用反相液相色譜法，可以解決80%左右的液相色譜課題。因此，必須給予反相色譜法足夠的重視。對於結構異構體等難分離物質的分離，則應選用吸附色譜法。
反相鍵合相色譜法
典型的反相鍵合色譜法是用非極性固定相和極性流動相組成的色譜體系。固定相，常用十八烷基（ODS或C）鍵合相；流動相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相色譜系統，用弱極性或中等極性的鍵合相和極性大於固定相的流動相組成。
(1) 分離機制 反相鍵合相表面具有非極性烷基官能團，及未被取代的矽醇基。矽醇基具有吸附效能，剩餘矽醇基的多寡，視覆蓋率而定。簡要介紹疏溶劑理論。
疏溶劑理論：當一個非極性溶質或溶質分子中的非極性部分與極性溶劑相接觸時，相互產生斥力，自由能（G）增加，熵減小，不穩定性增加。根據熱力學第二定律，系統由不穩定到穩定是自發的，即熵增加是自發的。因此，為了彌補熵的損失，溶質分子中非極性部分結構的取向，將導致在極性溶劑中形成一個“容腔”，這種效應稱為疏溶劑或疏水效應。該理論認為，在鍵合相反相色譜法中溶質的保留主要不是由於溶質分子與鍵合相間的色散力，而是溶質分子與極性溶劑分子間的排斥力，促使溶質分子與鍵合相的烴基發生疏水締合，且締合反應是可逆的。容量因子k與自由能變化△G的關係如下式：
lnk＝lnV/V－△G/RT (8·5)
上式中的R為理想氣體常數、T為熱力學溫度、V是色譜柱中鍵合相表面所鍵合的官能團的體積，V是色譜柱中流動相的體積。該式說明△G越大，被分離組分的k越小，保留時間越短。
(3) 特點 反相色譜法是應用最廣的色譜法，主要用於分離非極性至中等極性的各類分子型化合物，因為鍵合相表面的官能團不流失，溶劑的極性可以在很大範圍內調整，因此應用範圍很寬。由它派生的反相離子對色譜法與離子抑制色譜法，可以分離有機酸、鹼、鹽等離子型化合物。用反相液相色譜法，可以解決80%左右的液相色譜課題。因此，必須給予反相色譜法足夠的重視。對於結構異構體等難分離物質的分離，則應選用吸附色譜法。