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  • 1 # 養豬要努力

    公豬精子的活率是指豬原精液在37℃下呈直線運動的精子佔全部精子總數的百分率,活率0.8是80%的精子活力好,呈直線運動,具有授精能力。

    一般在豬人工授精中,精液活力不能低於0.7,活力低於0.7的精液應該棄去。豬場生產操作中,要根據原精的質量、活率,對原精液進行稀釋,然後進行授精。接下來為大家分享一些如何去檢查、稀釋、分裝、儲存、運輸精液的技術操作要點。

    精液的檢查

    1. 背景

    豬精液採集後,首先要評定公豬精液質量,然後才能對精液進行進一步處理,以獲取高質量的精液。處理精液以前,選擇能有效篩選精液的方法對提高豬場的繁殖效能是必要的。在最理想的情況下,在精液處理前對公豬的精液進行全面地評估,以鑑別出那些劣質精液。對儲藏的精液,每天必須檢查總活動精子數和評估精子的外形。這樣才能確保用於人工授精的精液不被汙染

    2. 精液的視覺檢查

    精液被送進實驗室之後,首先去掉採精容器上的薄紗布,確保不要有殘渣和塵土混入,以免影響精液的質量。

    將精液袋從採精杯中拿出,並將精液倒入測量杯中。對精液進行外觀檢查:

    a) 顏色:正常精液應該是乳白色或灰白色,就像脫脂乳。如果精液呈微紅或棕色,則說明混有血液;如果精液呈淡黃色,則說明可能混有尿液。變色精液應該棄之。

    b) 氣味:正常精液應該呈中性,略帶腥味,沒有不良氣味。如果精液中有氨味和尿味,就說明精液中可能混有氨氣和尿液,應該棄去不用。

    3. 精液的儀器檢查

    對精液進行外觀檢查之後,要對精液做進一步檢查:

    a) 質量:使用電子稱對精液質量進行稱量。

    b) 活力:使用顯微鏡對精液活力進行檢查。精子的活力是指原精液在37℃下呈直線運動的精子佔全部精子總數的百分率。精液活力不能低於70%,活力低於70%的精液應該棄去。測定方法是將一滴原精液(10µl)滴在一張預熱的顯微鏡載玻片上(37℃),將載玻片放於恆溫載物臺(37℃)之上,然後在顯微鏡下(400倍)觀察精子活力。

    c) 密度:使用精子密度測定儀對精子密度進行測定。

    操作流程:用玻璃棒取少量精液,將精液滴在密度儀載玻片前端的空隙內,然後將密度儀載玻片放入精子密度測定儀進行測定,讀取讀數。則該精液的密度為:讀數×107,比如一份精液檢測後精子密度儀的讀數為225,則這份精液的密度就是225×107。

    d) 精子畸形檢查:每次精液檢測合格後都要留樣,在載玻片上進行抹片,經過乾燥、脫水、染色等處理,然後在顯微鏡下觀察。正常精子形態像蝌蚪,形態異常的活力不高,為了保證受胎率必須檢查精子的形態。

    精子畸形一般分四類:

    a) 頭部異常,頭部巨大、瘦小、細長、圓形、輪廓不明顯、皺縮、缺損、雙頭等;

    b) 頸部異常,頸部膨大、纖細、曲折、不全、雙頸等;

    c) 尾部異常,彎曲、短小、缺損、雙尾等;

    d) 頂體異常,頂體不完全、異形。其中頂體完整率對受精影響最大。

    精子畸形檢查流程:

    一份合格的精液應該符合以下要求:

    4.注意事項

    精液檢測全程必須避光進行。

    檢查精液活力時受人為影響比較大,要求操作者技術熟練。檢測精子密度時,等精子密度儀完全歸零後再推入載玻片,待讀數穩定後再讀取資料。在精液稀釋後再進行一次精液活力檢查,確保精液質量。精子畸形必須定期進行,檢測時視野要具有隨機性,不能挑選檢測。每次檢測之後要對裝置進行清理檢查。精液的稀釋

    1. 背景與目的

    新採集的精液精子濃度高,溫度也較高,精子的代謝強度大,很快就會產生大量的代謝產物,並使其自身的生命耗盡。即使在很短的時間內,都可能因精子的代謝產物而造成對精子的毒害,使得精子儲存的時間縮短。使用合理的稀釋液稀釋精液,可給精子提供營養,中和代謝產物,並且允許精液降溫,從而大大延長精子的存活時間,同時保持精子的受精能力。

    所以,對精液儘快進行稀釋十分重要,這也是為什麼要將實驗室建在採精室隔壁的原因。另外,原精液的精子濃度大,而一次輸精所需的總精子數僅幾十個億,只相當於幾毫升到十幾毫升的原精,而母豬受精時需要的總精液量又不能低於80毫升,這也是為什麼必須稀釋的另一個原因。增加精液容量,以確保每頭母豬輸精的總精液量。有利於精子的體外存活和受精能力的維持。

    2. 精液的稀釋倍數

    目前,尚無每頭份精液的最低精子數標準和體積標準,但一般認為一次輸入15億以上個精子,對受胎率和產仔數是有保證的,但也沒有必要每頭份超過60億個精子。

    人工授精的正常劑量一般為30—50億個精子/劑量,體積為80-100 ml。美國採用30億/頭份(80 ml);中國一般採用40億左右 /頭份(100 ml)。一般情況,同一種稀釋液,精子密度越大,所消耗能量越多,儲存時間越短在原精液的活力(≥0.7)合格的前提下,決定精液最終稀釋倍數的因素有三個方面:

    原精液的精子濃度

    用於輸精的每份精液的體積或重量

    每份精液的總精子數

    計算精液的稀釋倍數並不是最終目的,最終目的是得到原精液經過稀釋最終達到的體積以及可分裝的份數。但最大稀釋的倍數最好不超過原精液體積的10倍。

    3. 精液的稀釋計算方法

    總有效精子數=原精液體積×原精液精子密度×精子活力(1g 精液約等於1ml)稀釋後精液分裝份數=總有效精子數÷每份精液的有效精子數原精液稀釋後的體積=可分裝的份數×每份精液的體積

    4. 精液的稀釋過程

    ① 把空塑膠杯或大燒杯放在電子秤上除去皮重。

    ② 將原精液從集精杯中提出放入塑膠杯或燒杯杯中。

    ④ 將與精液等溫的稀釋液緩緩加入杯中,邊注入邊輕輕攪勻,直到達到根據計算得到的稀釋總重量為止。

    ⑤ 稀釋過程中先進行1:1低倍稀釋,攪拌均勻後再將餘下的稀釋液緩慢加入。不能將稀釋液直接倒入精液,因精子需要一個適應過程。

    ⑥ 稀釋完後再次進行精子活力檢測。

    5. 精液稀釋的注意事項

    精液和稀釋液的溫差應儘可能小或是在等溫情況下進行稀釋,精液稀釋關鍵是溫度,在精液稀釋前,必須使精液和稀釋液儘可能等溫,兩者的溫度最多相差1℃。否則就可能對精子的活力產生不良影響。

    應將稀釋液加入精液中,而不應該相反。稀釋液應儘量沿杯壁緩慢流入原精液中,避免將稀釋液直接倒下,形成衝擊。精液稀釋的成敗,與所用儀器的清潔衛生有很大關係。所有使用過的燒杯、玻璃棒及溫度計,都要及時用蒸餾水洗滌,並進行消毒,這是稀釋後的精液能儲存、利用的重要條件。精液稀釋後要進行檢查活力,活力下降必須查明原因並加以改進。精液的分裝與儲存

    1. 精液分裝

    精液稀釋好後,應再一次檢查精子活力,活力應無明顯下降,否則棄之。

    調好精液分裝機,以80ML為單位(根據需要而定),將精液分裝至精液瓶或袋。如果沒有精液分裝機,則需要人工分裝,注意將精液沿精液瓶內壁緩緩倒入。

    空氣中的氧氣不利於精子的儲存,因此在封裝時應儘可能將其中存留的空氣排出。

    a) 精液瓶在擰上蓋子時,先將瓶蓋旋大半圈左右,然後擠壓瓶體使精液液麵上升至瓶口,再旋緊,以排出瓶中空氣。

    b) 袋裝精液在封口時,也應該先將其中空氣擠壓,使精液麵上升到接近封口處的高度,再用封口機熱封。

    2. 精液的貯存

    確定並核對需要貯存精液的資訊。

    分裝好的精液,不能立即放入17 ℃冰箱,應置22℃-25℃室溫1小時左右,以免因溫度下降過快而刺激精子,造成死精增多。待精液溫度下降接近室溫,把精液置於17℃的恆溫冰箱中進行儲存。填寫精液儲存報表。從精液放入冰箱開始,每隔12小時需要小心搖勻一次(上下顛倒),防止精子沉澱引起死亡。每次搖勻時,填寫時間與冰箱溫度。

    3. 精液分裝與儲存的注意事項

    分裝室應定期進行消毒,保持乾淨衛生,室內無菌。

    操作人員進入實驗室前需在準備間完成更衣,消毒程式。裝精液用的瓶子和袋子必須為對精子無毒害作用的塑膠製品。精液放入恆溫冰箱時,不同品種精液應分開放置,以免拿錯精液。精液貯存時應該平放置於恆溫冰箱中,不可疊放。恆溫冰箱必須放置靈敏的高低溫度計,以便準確檢查其溫度。分裝室應定期進行消毒,保持乾淨衛生,室內無菌。操作人員進入實驗室前需在準備間完成更衣,消毒程式。裝精液用的瓶子和袋子必須為對精子無毒害作用的塑膠製品。精液放入恆溫冰箱時,不同品種精液應分開放置,以免拿錯精液。精液貯存時應該平放置於恆溫冰箱中,不可疊放。恆溫冰箱必須放置靈敏的高低溫度計,以便準確檢查其溫度。精液的包裝與運輸

    1. 精液包裝前的準備

    包裝材料:

    a) 長途保溫箱:泡沫箱

    b) 短途保溫箱:車載17℃恆溫箱

    c) 低溫冰袋:長效,溫度變化緩慢

    d) 封箱膠帶:寬(125px左右)而透明的膠帶

    包裝前的準備:

    a) 將所需泡沫保溫箱和低溫冰袋放入17-20℃環境中,不少於5h。

    b) 需運輸外售的精液置於17至18℃恆溫冰箱內儲存至少3h。

    2. 精液包裝與運輸

    精液的包裝:需短途運輸的精液由兩層黑色塑膠袋包裹,放置在17℃恆溫箱內;需長途運輸的精液放在兩層泡沫箱中。

    a) 無論袋裝或瓶裝精液都需平鋪疊放,袋裝精液,四層放一層冰袋;瓶裝精液,兩層放一層冰袋。若泡沫箱未裝滿,可用塊狀泡沫填充,以免運輸顛簸致使精液瓶/袋混亂且精液受到震動短途保溫箱:車載17℃恆溫箱。

    b) 蓋上蓋子,用膠帶將箱體的縫隙密封好。

    c) 填寫精液資訊卡,內容包括精液種類、數量、型別(袋裝或瓶裝)、採精時間、包裝時間、準備人姓名等,並將其貼於箱蓋上,用透明膠帶蓋住。

    d) 箱蓋子上正規寫好收貨人的姓名及聯絡電話,便於接收。

    精液運輸:

    a) 短途運輸:當精液送到農場外部,開啟恆溫箱,取出精液,將最外層的塑膠袋解開,留在農場外,將精液放入農場專用保溫箱內。

    b) 長途運輸:選擇合適的運輸方式將精液運至目的地。

    3.精液包裝與運輸的注意事項

    包裝運輸過程中避免溫度波動過大,從而對精子造成損傷。

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