速測卡法（紙片法）

2 原理

膽鹼酯酶可催化靛酚乙酸酯（紅色）水解為乙酸與靛酚（藍色），有機磷或氨基甲酸脂類農藥對膽鹼酯酶有抑制作用，使催化、水解、變色的過程發生改變，由此可判斷出樣品中是否有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農藥的存在。

3 試劑

3.1 固化有膽鹼酯酶和靛酚乙酸酯試劑的紙片（速測卡）。

3.2 pH7.5緩衝溶液：分別取15.0g磷酸氫二鈉 [Na2HPO4·12H2O]與1.59g無水磷酸二氫鉀[KH2 PO4 ]，用500mL蒸餾水溶解。

4 儀器

4.1 常量天平

4.2 有條件時配備37℃±2℃恆溫裝置。

5 分析步驟

5.1 整體測定法

5.1.1 選取有代表性的蔬菜樣品，擦去表面泥土，剪成1cm左右見方碎片，取5g放入帶蓋瓶中，加入10mL緩衝溶液，振搖50次，靜置2min以上。

5.1.2 取一片速測卡，用白色藥片沾取提取液，放置10min以上進行預反應，有條件時在37℃恆溫裝置中放置10min。預反應後的藥片表面必須保持溼潤。

5.1.3 將速測卡對摺，用手捏3min或用恆溫裝置恆溫3min，使紅色藥片與白色藥片疊合發生反應。

5.1.4 每批測定應設一個緩衝液的空白對照卡。

5.2 表面測定法（粗篩法）

5.2.1 擦去蔬菜表面泥土，滴2滴～3滴緩衝溶液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦。

5.2.2 取一片速測卡，將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上。

5.2.3 放置10min以上進行預反應，有條件時在37℃恆溫裝置中放置10min。預反應後的藥片表面必須保持溼潤。

5.2.4 將速測卡對摺，用手捏3min或用恆溫裝置恆溫3min，使紅色藥片與白色藥片疊合發生反應。

5.2.5 每批測定應設一個緩衝液的空白對照卡。

6 結果判定

結果以酶被有機磷或氨基甲酸酯類農藥抑制（為陽性）、未抑制（為陰性）表示。

與空白對照卡比較，白色藥片不變色或略有淺藍色均為陽性結果。白色藥片變為天藍色或與空白對照卡相同，為陰性結果。

對陽性結果的樣品，可用其它分析方法進一步確定具體農藥品種和含量。

7 附則

7.1 速測卡技術指標

7.1.1 靈敏度指標：速測卡對部分農藥的檢出限見表1。

7.1.2 符合率：在檢出的30份以上陽性樣品中，經氣相色譜法驗證，陽性結果的符合率應在80%以上。

8 說明

8.1 蔥、蒜、蘿蔔、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對酶有影響的植物次生物質，容易產生假陽性。處理這類樣品時，可採取整株（體）蔬菜浸提或採用表面測定法。對一些含葉綠素較高的蔬菜，也可採取整株（體）蔬菜浸提的方法，減少色素的干擾。

8.2 當溫度條件低於37℃，酶反應的速度隨之放慢，藥片加液後放置反應的時間應相對延長，延長時間的確定，應以空白對照卡用手指（體溫）捏3min時可以變藍，即可往下操作。注意樣品放置的時間應與空白對照卡放置的時間一致才有可比性。空白對照卡不變色的原因：一是藥片表面緩衝溶液加的少、預反應後的藥片表面不夠溼潤，二是溫度太低。

8.3 紅色藥片與白色藥片疊合反應的時間以3min為準，3min後的藍色會逐漸加深，24h後顏色會逐漸退去。

酶抑制率法（分光光度法）

9 原理

在一定條件下，有機磷和氨基甲酸酯類農藥對膽鹼酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農藥的濃度呈正相關。正常情況下，酶催化神經傳導代謝產物（乙醯膽鹼）水解，其水解產物與顯色劑反應，產生黃色物質，用分光光度計在412nm處測定吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率，透過抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農藥的存在。

10 試劑

10.1 pH8.0緩衝溶液：分別取11.9g無水磷酸氫二鉀與3.2g磷酸二氫鉀，用1000mL蒸餾水溶解。

10.2 顯色劑：分別取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸氫鈉，用20mL緩衝溶液溶解，4℃冰箱中儲存。

10.3 底物：取25.0mg硫代乙醯膽鹼，加3.0mL蒸餾水溶解，搖勻後置4℃冰箱中儲存備用。儲存期不超過兩週。

10.4 乙醯膽鹼酯酶：根據酶的活性情況，用緩衝溶液溶解，3 min的吸光度變化 D A 0 值應控制在0.3以上。搖勻後置4℃冰箱中儲存備用，儲存期不超過四天。

10.5 可選用由以上試劑製備的試劑盒。乙醯膽鹼酯酶的 D A 0 值應控制在0.3以上。

11 儀器

11.1 分光光度計或相應測定儀。

11.2 常量天平。

11.3 恆溫水浴或恆溫箱。

12 分析步驟

12.1 樣品處理：選取有代表性的蔬菜樣品，沖洗掉表面泥土，剪成1cm左右見方碎片，取樣品1g，放入燒杯或提取瓶中，加入5mL緩衝溶液，振盪1 min～2min，倒出提取液，靜置3 min ～5min，待用。

12.2 對照溶液測試：先於試管中加入2.5mL緩衝溶液，再加入0.lmL酶液、0.1mL顯色劑，搖勻後於37℃放置15min以上（每批樣品的控制時間應一致）。加入0.lmL底物搖勻，此時檢液開始顯色反應，應立即放入儀器比色池中，記錄反應3 min的吸光度變化值 D A 0 。

12.3 樣品溶液測試：先於試管中加入2.5mL樣品提取液，其它操作與對照溶液測試相同，記錄反應3min的吸光度變化值 D A t 。

13 結果的表述計算

13.1 結果計算

見式（1）。

抑制率(%)=[ ( D A 0 - D A t )/ D A 0 ]×100…………………………（1）

式中： D A 0 ——對照溶液反應3min吸光度的變化值；

D A t ——樣品溶液反應3min吸光度的變化值。

13.2 結果判定

結果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。

當蔬菜樣品提取液對酶的抑制率≥50%時，表示蔬菜中有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農藥存在，樣品為陽性結果。陽性結果的樣品需要重複檢驗2次以上。

對陽性結果的樣品，可用其它方法進一步確定具體農藥品種和含量。

14 附則

14.1 酶抑制率法技術指標

14.1.1 靈敏度指標：酶抑制率法對部分農藥的檢出限見表2。

14.1.2 符合率：在檢出的抑制率≥50%的30份以上樣品中，經氣相色譜法驗證，陽性結果的符合率應在80%以上。

15 說明

15.1 蔥、蒜、蘿蔔、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對酶有影響的植物次生物質，容易產生假陽性。處理這類樣品時，可採取整株（體）蔬菜浸提。對一些含葉綠素較高的蔬菜，也可採取整株（體）蔬菜浸提的方法，減少色素的干擾。

15.2 當溫度條件低於37℃，酶反應的速度隨之放慢，加入酶液和顯色劑後放置反應的時間應相對延長，延長時間的確定，應以膽鹼酯酶空白對照測試3min的吸光度變化 D A 0 值在0.3以上，即可往下操作。注意樣品放置時間應與空白對照溶液放置時間一致才有可比性。膽鹼酯酶空白對照溶液3min的吸光度變化 D A 0 值＜0.3 的原因：一是酶的活性不夠，二是溫度太低。

1 主題內容與適用範國

本標準規定了香蕉收購的等級規格、質量指標、檢驗規則、方法及包裝要求。

本標準適用於香蕉果品的條蕉、梳蕉的收購質量規格。

2 引用標準

GB 2762 食品中汞允許量標準

GB 2763 糧食、蔬菜等食品中六六六、滴滴涕殘留量標準

3 術語

3.1 條蕉:指果穗(串蕉)。

3.2 梳蕉:指果手(果段)。

3.3 果指:指每隻果實。

3.4 同一類品種特徵:指香蕉的形狀、色澤相似之性狀.

3.5 果實長度:指自果柄基部沿果身外弧線到果頂的長度。

3.6 中間一梳:指整條蕉奇數的中間一梳或偶數中間的兩梳平均數。

3.7 形狀完整；指香蕉果實排列緊密有規律、果實大小基本一致，不缺果指，無連體蕉和扭曲等畸形蕉。

3.8 皮色青綠:指果實色澤保持香蕉自然青綠色。

3.9 成熟適當:指各個不同季節的蕉已達到適當成熟階段。

3.10 飽滿度標準:果身微四，稜角明顯，其飽滿度為7%以下，果身圓滿，尚見稜角為75%~80%；果身圓滿無稜者為過熟現象。

3.11 腐爛，指任何腐敗損及果軸、粱柄以及果實部分者。

3.12 裂果:指果皮破裂，露出果肉。

3.13 斷果:指果實折斷為兩段或多段。

3.14 裂軸:指果軸因割切不當或指座不堅實而受外力破裂者。

3.15 折柄:指果柄受損面流乳汁。

3.16 輕度損害。

3.16.1 壓傷、擦傷:指果實被壓或磨擦而損傷，但不明顯。

3.16.2 日灼:指果實被曝日灼傷，使果皮失去正常色澤。

3.16.3 疤痕

a.水鏽:指香蕉果實表皮部發生之鏽跡。一梳蕉中按只數計，不得超過10%

b.傷痕:指被風傷害或鳥、昆蟲等動物咬傷，抓傷果皮而形成的疤。一梳蕉中按只數計，不得超過5%。

3.16.4 黑星病:果皮被害部分呈黑斑點。平均每平方釐米不得超過1點。

3.17 一般損害

3.17.1 壓傷、擦傷；一梳蕉中平均不得超過2cm2。

3.17.2 日灼：一梳蕉中按只數計，不得超過5%。

3.17.3 疤痕

a.水鏽：一梳蕉中按只數計，不得超過20%。

b.傷疤：一梳蕉中按只數計，不得超過10%。

3.17.4 黑星病平均每平方釐米不得超過3點。

3.18 重損害

3.18.1 壓傷、擦傷：一梳蕉中平均不得超過4cm。

3.18.2 日灼：一梳蕉中按只數計，不得超過10%。

3.18.3 疤痕

a.水鏽：一梳蕉中按只數計，不得超過30%。

b.傷疤：一梳蕉中按只數計，不得超過20%。

3.18.4 黑星病平均每平方釐米不得超過6點。

3.19 清潔：指果實無塵土、農藥殘留或任何其他物質汙染。

4 質量指標

4.1 規格質量

4.11 條蕉分級：條蕉依品質分為優等品、一等品和合格品三個等級，應符合表1的各項指標規定。

更多