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  • 1 # 秋天的眼淚

    標本經稀鹽酸水解後,DNA分子中的嘌呤鹼基被解離,從而在核糖的一端出現了醛基。試劑中的無色品紅可與醛基反應,形成含有醌基的化合物分子, 因醌基為髮色團,故可呈現出紫紅色。也就是說, DNA經稀酸水解後產生的醛基,具有還原作用,可與無色品紅結合形成紫紅色化合物,從而顯示出DNA的分佈。

      2HCl+Na2S2O5→2NaCl+SO2+H2SO3

      DNA是主要的遺傳物質,集中於染色體上。1924年孚爾根首先用席夫試劑(Schiff)作試驗,鑑定了染色體上DNA的存在,故稱為孚爾根染色法 。孚爾根染色法的反應原理主要與席夫試劑的化學性質有關,此試劑的基本成分是鹼性品紅,偏亞硫酸氫鈉(NaHSO3)和鹽酸.鹼性品紅的主要成分是三氨基三苯甲烷氯化物。

      鹼性品紅原為桃紅色,當與亞硫酸作用時被氧化,使醌型變為苯型,由桃紅色變為無色透明的N-亞磺酸亞硫酸副品紅鹼,當它與醛基作用時,其分子式又恢復為醌型結構,呈現紫紅色

      利用1N HCl 、60℃下水解時,可將DNA分子中嘌呤鹼基與去氧核糖之間的糖苷鍵打斷,使嘌呤脫下,並使去氧核糖C-1位置釋放醛基與席夫試劑反應顯紫紅色。細胞中只有DNA才具有這種專一性的孚爾根反應,因此利用孚爾根反應,可以鑑定DNA的存在。並廣泛應用於核及染色體的研究中。

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