羊肚菌（Morchella）屬子囊菌門（Ascomycota）、盤菌綱（Pezizimycetes）、盤菌目（Pezizales）、羊肚菌科（Morchellaceae）。因其表面呈蜂窩狀，外形常為圓頂或尖頂，與羊肚頗為相似，故名為羊肚菌。
羊肚菌肉質脆嫩，含有豐富的氨基酸、多糖、脂肪酸，其營養價值較高，是世界公認的珍貴食用真菌。在歐洲各地，羊肚菌以其鮮美的味道被認為是僅次於塊菌的美味食用菌，北美人同樣認為它是食用菌中的佳品。羊肚菌在中國最早被收載於《本草綱目》，中醫以其子實體入藥，因性平味甘，故具有健脾、化痰理氣、益腸消食等功效。
技術實現要素：
為了解決上述技術問題，本發明提供一種羊肚菌菌種快速繁育方法，該方法能夠顯著縮短羊肚菌菌種的繁育週期，並且能有效提高羊肚菌菌種繁育的產量。
本發明透過下述技術方案實現：
一種羊肚菌菌種快速繁育方法，其特徵在於，包括以下步驟：
（1）種菇選擇：選取菇柄長1～2釐米、菇帽長3～4釐米、紋路清晰、褶皺緊密的羊肚菌種菇連根拔除，清除雜質後攤晾至含水量為60～70%，以提高組織分離可操作性，降低細菌感染的機率；
（2）無糖培養基製備：將土豆去皮後切成0.9～1.1cm3的顆粒，稱取200份，加水煮沸18～20分鐘，趁熱過濾後取濾液，向濾液中補充熱水後加入瓊脂粉，攪拌溶解後趁熱轉入三角瓶中滅菌，趁熱取出三角瓶放入超淨工作臺或者接種箱內，消毒後將無糖培養基均勻分裝到平板皿中，冷卻備用；
（3）菌種分離：將步驟（1）中的種菇、無糖培養基和分離器具滅菌後，切開種菇菌蓋，鏟取小塊菌肉，接入平板皿中的無糖培養基內，16～18℃培養4～6天后即可看到組織塊周圍長出白色稀疏纖細的菌絲，7～8天后待菌絲長到直徑1.5～2cm的菌落時即可提純；
（4）接種：從步驟（3）所得無糖培養基中挑取4～5mm見方大的培養基2塊，放入試管內的提純培養基的兩個三分點上，每個三角瓶可接20～30支，16～18℃下培養1天后即可看到菌種塊周圍長出白色稀疏的菌絲，9～10天菌絲即可長滿試管；
（5）羊肚菌原種製作：將試管中長滿菌絲的提純培養基切成0.9～1.1cm的片段，每片段接入1瓶滅菌後的原種培養基內，一支試管能夠接6～8瓶原種，溫度16～18℃、溼度60%條件下培養，第2天菌絲即可吃料，5～7天菌絲即可封面；
（6）搖瓶：菌絲封面後，在培養室內，緊握菌種瓶，上下搖動8～10次，使長有菌絲的麥粒均勻分佈在菌種瓶中，繼續培養3～5天，菌種瓶中可見大量黃色菌核產生，即可下地播種，每畝用種量380～410瓶。
其中，步驟（4）中所述提純培養基的製備方法如下：
取20份黃豆打磨成豆漿後加入葡萄糖20份、瓊脂粉20份、KH2P04 1.5份、MgSO41.5份、酵母膏1份充分溶解，調節PH值為7，採用20mm×200mm的玻璃試管，每個玻璃試管裝入試管高度1/5的溶液，用試管塞封口，滅菌後襬放傾斜，冷卻後即得提純培養基。
步驟（5）中所述原種培養基的製備方法如下：
1）選用當年無蟲優質麥粒60份，提前48小時加水浸泡，同時加入石灰1份，浸泡至無白心時撈出瀝乾水分備用；
2）取木屑30份提前備好用水淋透，自然堆放至棕黃色備用；
3）將上述步驟中製備好的麥粒、木屑以及草炭土8份、石膏1份混合均勻後裝入750ml菌種瓶，裝瓶時裝至瓶身2/3處即可，種瓶上下鬆緊一致，最後用棉花或者塑膠薄膜封口。
在原種培養基中，麥粒富含澱粉和灰分營養更易於菌絲吸收，木屑增加培養基透氣性，易於菌絲生長，草炭土含大量腐殖酸和微量元素增加菌絲活力，能夠有效促進菌核形成，利於羊肚菌菌絲的快速生長。
羊肚菌屬於子囊菌，其生長過程較為複雜，且生長過程中，子囊、菌絲體、子實體形態大小會發生較大變化，其次，不同種的羊肚菌菌種具有不同的培養條件，其生長速度、生長習性、菌核發育、菌絲和菌核的顏色等都有明顯的差異。目前羊肚菌菌種的獲取方法各式各樣，如組織分離、孢子分離、菌土分離等導致品種退化非常嚴重。以上原因導致目前羊肚菌菌種生產的週期長、產量不穩定，甚至絕收，難以滿足市場供應。
本發明的菌種生產由傳統的先生產原種再生產栽培種用於播種，改進為直接生產原種播種，去掉了原種擴繁為栽培種的環節，菌種繁育時間縮短了24～25天，進一步地，改進接種方式，接種方式由1個點位接種改進為2個點位接種，將菌種在試管內的提純培養基生長的時間由10天縮短到6天，再透過改變原種培養方式，將傳統的靜置培養改為搖瓶培養，使得原種培養時間縮短5天以上。因此，本發明的羊肚菌菌種繁育方法有效將傳統的70天縮短到33～36天，大大提升了菌種制種效率，適合在羊肚菌栽培中推廣。
本發明直接採用原種播種，由於減少了種子繁殖代數，避免菌種由於擴繁導致的退化和衰弱，保證了種子活性，其適應性和抗逆性更強，利於羊肚菌播種後的快速生長髮育，提高產量。
與傳統的分離培養基相比，本發明採用了不含葡萄糖的無糖培養基，由於羊肚菌菌絲由組織塊的再生萌發長成，能夠快速附著在培養基表面，而雜菌菌絲必須由芽孢萌發長成，芽孢在無糖培養基表面由於養分不夠很難萌發，減少了雜菌滋生的機會，因而無糖培養基能夠避免菌種被雜菌汙染，使羊肚菌更易存活生長，提高菌種分離的成活率，提高羊肚菌菌種的產量，為做羊肚菌品種的分類鑑定及品種選育奠定了基礎。
本發明透過將菌種分離容器由試管改進為三角瓶，將菌種繁殖數量由8～10支增加到25～30支，大大提高了原種的產量，利於大範圍播種。
本發明與現有技術相比，具有如下的優點和有益效果：
（1）本發明的菌種生產由傳統的先生產原種再生產栽培種用於播種，改進為直接生產原種播種，去掉了原種擴繁為栽培種的環節，大大縮短了菌種制種時間，同時由於減少了種子繁殖代數，保證種子活性，其適應性和抗逆性更強；
（2）透過改進接種方式、改變原種培養方式有效將菌種培養時間縮短9天以上，同時本發明直接採用原種播種，因而整個菌種繁育方法由傳統的70天縮短到33～36天；
（3）透過將菌種分離容器由試管改進為三角瓶，提純培養時菌種繁殖數量由8～10支增加到25～30支，大大提高了繁育出的菌種的產量。
具體實施方式
為使本發明的目的、技術方案和優點更加清楚明白，下面結合實施例，對本發明作進一步的詳細說明，本發明的示意性實施方式及其說明僅用於解釋本發明，並不作為對本發明的限定。
實施例1
（1）種菇選擇：採集當地人工種植或野生的羊肚菌，選取菇柄長1～2釐米、菇帽長3～4釐米、紋路清晰、褶皺緊密、菇型勻稱、無蟲無病蟲害的羊肚菌，採菇時將種菇整連根拔除，去掉多餘泥土和雜質，用紙質取樣袋密封，攤晾至含水量60%備用；
（2）無糖培養基製備：取澱粉含量高的土豆，去皮後切成0.9cm3的顆粒，稱取200g，加水1000ml放入鍋內煮沸20分鐘，趁熱過濾後取濾液，向濾液中補充熱水至1000ml後加入瓊脂粉，攪拌溶解後趁熱轉入三角瓶中滅菌，滅菌方法為，將三角瓶直立放在醫用高壓鍋內密封，通電加熱，開啟排氣閥，待鍋內水沸騰持續5分鐘排氣閥均勻排氣時，表示鍋內冷空氣已排盡，關閉排氣閥待溫度上升至120℃時開始計時，維持40分鐘後斷電，滅菌完成後，趁熱取出三角瓶放入超淨工作臺或者接種箱內，消毒後將無糖培養基均勻分裝到平板皿中，冷卻備用；
（3）菌種分離：將種菇、無糖培養基和分離器具置於超淨工作臺中，超淨臺工作20分鐘達到無菌要求後用刀片將種菇菌蓋切開，利用接種鏟取小塊菌肉，接入平板皿中的無糖培養基內，16℃培養4天后即可看到組織塊周圍長出白色稀疏纖細的菌絲，8天后待菌絲長到直徑1.5cm的菌落時即可提純；
（4）接種：從無糖培養基中挑取4mm見方大的培養基2塊，放入試管內的提純培養基的兩個三分點上，每個三角瓶可接28支，16℃下培養1天后即可看到菌種塊周圍長出白色稀疏的菌絲，10天菌絲即可長滿試管，其中，所述提純培養基的製備方法如下：
取20g黃豆打磨成1000ml豆漿後加入葡萄糖20g、瓊脂粉20g、KH2P04 1.5g、MgSO41.5g、酵母膏1g充分溶解，調節PH值為7，採用20mm×200mm的玻璃試管，每個玻璃試管裝入試管高度1/5的溶液，用試管塞封口，滅菌後襬放傾斜，冷卻後即得提純培養基；
（5）羊肚菌原種製作：將試管中長滿菌絲的提純培養基切成0.9cm的片段，每片段接入1瓶滅菌後的原種培養基內，原種培養基溫度降到25℃，接種在接種箱或接種室內進行，一支試管可接8瓶原種，溫度18℃、溼度60%條件下培養，第2天菌絲即可吃料，6天菌絲即可封面，其中，所述原種培養基的製備方法如下：
選用當年無蟲優質麥粒60g，提前48小時加水浸泡，同時加入石灰1g，浸泡至無白心時撈出瀝乾水分備用，取木屑30g提前備好用水淋透，自然堆放至棕黃色備用，將製備好的麥粒、木屑以及草炭土8g、石膏1g混合均勻後裝入750ml菌種瓶，裝瓶時裝至瓶身2/3處即可，種瓶上下鬆緊一致，最後用棉花或者塑膠薄膜封口後，採用高壓滅菌裝置，壓力0.14MPa下滅菌3小時；
（6）搖瓶：菌絲封面後，在培養室內，緊握菌種瓶，上下搖動8～10次，使長有菌絲的麥粒均勻分佈在菌種瓶中，繼續培養5天，菌種瓶中可見大量黃色菌核產生，即可下地播種，每畝用種量400瓶。
實施例2
（1）種菇選擇：採集當地人工種植或野生的羊肚菌，選取菇柄長1～2釐米、菇帽長3～4釐米、紋路清晰、褶皺緊密、菇型勻稱、無蟲無病蟲害的羊肚菌，採菇時將種菇整連根拔除，去掉多餘泥土和雜質，用紙質取樣袋密封，攤晾至含水量70%備用；
（2）無糖培養基製備：取澱粉含量高的土豆，去皮後切成1.1cm3的顆粒，稱取200g，加水1000ml放入鍋內煮沸20分鐘，趁熱過濾後取濾液，向濾液中補充熱水至1000ml後加入瓊脂粉，攪拌溶解後趁熱轉入三角瓶中滅菌，滅菌方法為，將三角瓶直立放在醫用高壓鍋內密封，通電加熱，開啟排氣閥，待鍋內水沸騰持續5分鐘排氣閥均勻排氣時，表示鍋內冷空氣已排盡，關閉排氣閥待溫度上升至120℃時開始計時，維持40分鐘後斷電，滅菌完成後，趁熱取出三角瓶放入超淨工作臺或者接種箱內，消毒後將無糖培養基均勻分裝到平板皿中，冷卻備用；
（3）菌種分離：將種菇、無糖培養基和分離器具置於超淨工作臺中，超淨臺工作20分鐘達到無菌要求後用刀片將種菇菌蓋切開，利用接種鏟取小塊菌肉，接入平板皿中的無糖培養基內，18℃培養4天后即可看到組織塊周圍長出白色稀疏纖細的菌絲，7天后待菌絲長到直徑1.5cm的菌落時即可提純；
（4）接種：從無糖培養基中挑取5mm見方大的培養基2塊，放入試管內的提純培養基的兩個三分點上，每個三角瓶可接30支，18℃下培養1天后即可看到菌種塊周圍長出白色稀疏的菌絲，9天菌絲即可長滿試管，其中，所述提純培養基的製備方法如下：
（5）羊肚菌原種製作：將試管中長滿菌絲的提純培養基切成1.1cm的片段，每片段接入1瓶滅菌後的原種培養基內，原種培養基溫度降到25℃，接種在接種箱或接種室內進行，一支試管可接8瓶原種，溫度16℃、溼度60%條件下培養，第2天菌絲即可吃料，5天菌絲即可封面，其中，所述原種培養基的製備方法如下：
（6）搖瓶：菌絲封面後，在培養室內，緊握菌種瓶，上下搖動8～10次，使長有菌絲的麥粒均勻分佈在菌種瓶中，繼續培養5天，菌種瓶中可見大量黃色菌核產生，即可下地播種，每畝用種量380瓶。
實施例3
（1）種菇選擇：採集當地人工種植或野生的羊肚菌，選取菇柄長1～2釐米、菇帽長3～4釐米、紋路清晰、褶皺緊密、菇型勻稱、無蟲無病蟲害的羊肚菌，採菇時將種菇整連根拔除，去掉多餘泥土和雜質，用紙質取樣袋密封，攤晾至含水量65%備用；
（2）無糖培養基製備：取澱粉含量高的土豆，去皮後切成1.0cm3的顆粒，稱取200g，加水1000ml放入鍋內煮沸19分鐘，趁熱過濾後取濾液，向濾液中補充熱水至1000ml後加入瓊脂粉，攪拌溶解後趁熱轉入三角瓶中滅菌，滅菌方法為，將三角瓶直立放在醫用高壓鍋內密封，通電加熱，開啟排氣閥，待鍋內水沸騰持續5分鐘排氣閥均勻排氣時，表示鍋內冷空氣已排盡，關閉排氣閥待溫度上升至120℃時開始計時，維持40分鐘後斷電，滅菌完成後，趁熱取出三角瓶放入超淨工作臺或者接種箱內，消毒後將無糖培養基均勻分裝到平板皿中，冷卻備用；
（3）菌種分離：將種菇、無糖培養基和分離器具置於超淨工作臺中，超淨臺工作20分鐘達到無菌要求後用刀片將種菇菌蓋切開，利用接種鏟取小塊菌肉，接入平板皿中的無糖培養基內，17℃培養5天后即可看到組織塊周圍長出白色稀疏纖細的菌絲，8天后待菌絲長到直徑1.8cm的菌落時即可提純；
（4）接種：從無糖培養基中挑取5mm見方大的培養基2塊，放入試管內的提純培養基的兩個三分點上，每個三角瓶可接29支，17℃下培養1天后即可看到菌種塊周圍長出白色稀疏的菌絲，9天菌絲即可長滿試管，其中，所述提純培養基的製備方法如下：
（5）羊肚菌原種製作：將試管中長滿菌絲的提純培養基切成0.9cm的片段，每片段接入1瓶滅菌後的原種培養基內，原種培養基溫度降到25℃，接種在接種箱或接種室內進行，一支試管可接8瓶原種，溫度17℃、溼度60%條件下培養，第2天菌絲即可吃料，7天菌絲即可封面，其中，所述原種培養基的製備方法如下：
（6）搖瓶：菌絲封面後，在培養室內，緊握菌種瓶，上下搖動8～10次，使長有菌絲的麥粒均勻分佈在菌種瓶中，繼續培養4天，菌種瓶中可見大量黃色菌核產生，即可下地播種，每畝用種量390瓶。
實施例4
（4）接種：從無糖培養基中挑取5mm見方大的培養基2塊，放入試管內的提純培養基的兩個三分點上，每個三角瓶可接29支，18℃下培養1天后即可看到菌種塊周圍長出白色稀疏的菌絲，10天菌絲即可長滿試管，其中，所述提純培養基的製備方法如下：
（5）羊肚菌原種製作：將試管中長滿菌絲的提純培養基切成1.1cm的片段，每片段接入1瓶滅菌後的原種培養基內，原種培養基溫度降到25℃，接種在接種箱或接種室內進行，一支試管可接8瓶原種，溫度18℃、溼度60%條件下培養，第2天菌絲即可吃料，5天菌絲即可封面，其中，所述原種培養基的製備方法如下：
（6）搖瓶：菌絲封面後，在培養室內，緊握菌種瓶，上下搖動8～10次，使長有菌絲的麥粒均勻分佈在菌種瓶中，繼續培養5天，菌種瓶中可見大量黃色菌核產生，即可下地播種，每畝用種量385瓶。
實施例5
（2）無糖培養基製備：取澱粉含量高的土豆，去皮後切成1.1cm3的顆粒，稱取200g，加水1000ml放入鍋內煮沸18分鐘，趁熱過濾後取濾液，向濾液中補充熱水至1000ml後加入瓊脂粉，攪拌溶解後趁熱轉入三角瓶中滅菌，滅菌方法為，將三角瓶直立放在醫用高壓鍋內密封，通電加熱，開啟排氣閥，待鍋內水沸騰持續5分鐘排氣閥均勻排氣時，表示鍋內冷空氣已排盡，關閉排氣閥待溫度上升至120℃時開始計時，維持40分鐘後斷電，滅菌完成後，趁熱取出三角瓶放入超淨工作臺或者接種箱內，消毒後將無糖培養基均勻分裝到平板皿中，冷卻備用；
（3）菌種分離：將種菇、無糖培養基和分離器具置於超淨工作臺中，超淨臺工作20分鐘達到無菌要求後用刀片將種菇菌蓋切開，利用接種鏟取小塊菌肉，接入平板皿中的無糖培養基內，16℃培養5天后即可看到組織塊周圍長出白色稀疏纖細的菌絲，7天后待菌絲長到直徑2cm的菌落時即可提純；
（4）接種：從無糖培養基中挑取4mm見方大的培養基2塊，放入試管內的提純培養基的兩個三分點上，每個三角瓶可接30支，18℃下培養1天后即可看到菌種塊周圍長出白色稀疏的菌絲，9天菌絲即可長滿試管，其中，所述提純培養基的製備方法如下：
（5）羊肚菌原種製作：將試管中長滿菌絲的提純培養基切成0.9cm的片段，每片段接入1瓶滅菌後的原種培養基內，原種培養基溫度降到25℃，接種在接種箱或接種室內進行，一支試管可接8瓶原種，溫度17℃、溼度60%條件下培養，第2天菌絲即可吃料，6天菌絲即可封面，其中，所述原種培養基的製備方法如下：
經發明人大量的試驗和探索，最終得出上述羊肚菌菌種快速繁育方法，該方法在保證菌種品質、存活率和產量的前提下，大大縮短了羊肚菌菌種繁育週期，滿足市場需求。
以上所述的具體實施方式，對本發明的目的、技術方案和有益效果進行了進一步詳細說明，所應理解的是，以上所述僅為本發明的具體實施方式而已，並不用於限定本發明的保護範圍，凡在本發明的精神和原則之內，所做的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護範圍之內。
羊肚菌（Morchella）屬子囊菌門（Ascomycota）、盤菌綱（Pezizimycetes）、盤菌目（Pezizales）、羊肚菌科（Morchellaceae）。因其表面呈蜂窩狀，外形常為圓頂或尖頂，與羊肚頗為相似，故名為羊肚菌。
羊肚菌肉質脆嫩，含有豐富的氨基酸、多糖、脂肪酸，其營養價值較高，是世界公認的珍貴食用真菌。在歐洲各地，羊肚菌以其鮮美的味道被認為是僅次於塊菌的美味食用菌，北美人同樣認為它是食用菌中的佳品。羊肚菌在中國最早被收載於《本草綱目》，中醫以其子實體入藥，因性平味甘，故具有健脾、化痰理氣、益腸消食等功效。
技術實現要素：
為了解決上述技術問題，本發明提供一種羊肚菌菌種快速繁育方法，該方法能夠顯著縮短羊肚菌菌種的繁育週期，並且能有效提高羊肚菌菌種繁育的產量。
本發明透過下述技術方案實現：
一種羊肚菌菌種快速繁育方法，其特徵在於，包括以下步驟：
（1）種菇選擇：選取菇柄長1～2釐米、菇帽長3～4釐米、紋路清晰、褶皺緊密的羊肚菌種菇連根拔除，清除雜質後攤晾至含水量為60～70%，以提高組織分離可操作性，降低細菌感染的機率；
（2）無糖培養基製備：將土豆去皮後切成0.9～1.1cm3的顆粒，稱取200份，加水煮沸18～20分鐘，趁熱過濾後取濾液，向濾液中補充熱水後加入瓊脂粉，攪拌溶解後趁熱轉入三角瓶中滅菌，趁熱取出三角瓶放入超淨工作臺或者接種箱內，消毒後將無糖培養基均勻分裝到平板皿中，冷卻備用；
（3）菌種分離：將步驟（1）中的種菇、無糖培養基和分離器具滅菌後，切開種菇菌蓋，鏟取小塊菌肉，接入平板皿中的無糖培養基內，16～18℃培養4～6天后即可看到組織塊周圍長出白色稀疏纖細的菌絲，7～8天后待菌絲長到直徑1.5～2cm的菌落時即可提純；
（4）接種：從步驟（3）所得無糖培養基中挑取4～5mm見方大的培養基2塊，放入試管內的提純培養基的兩個三分點上，每個三角瓶可接20～30支，16～18℃下培養1天后即可看到菌種塊周圍長出白色稀疏的菌絲，9～10天菌絲即可長滿試管；
（5）羊肚菌原種製作：將試管中長滿菌絲的提純培養基切成0.9～1.1cm的片段，每片段接入1瓶滅菌後的原種培養基內，一支試管能夠接6～8瓶原種，溫度16～18℃、溼度60%條件下培養，第2天菌絲即可吃料，5～7天菌絲即可封面；
（6）搖瓶：菌絲封面後，在培養室內，緊握菌種瓶，上下搖動8～10次，使長有菌絲的麥粒均勻分佈在菌種瓶中，繼續培養3～5天，菌種瓶中可見大量黃色菌核產生，即可下地播種，每畝用種量380～410瓶。
其中，步驟（4）中所述提純培養基的製備方法如下：
取20份黃豆打磨成豆漿後加入葡萄糖20份、瓊脂粉20份、KH2P04 1.5份、MgSO41.5份、酵母膏1份充分溶解，調節PH值為7，採用20mm×200mm的玻璃試管，每個玻璃試管裝入試管高度1/5的溶液，用試管塞封口，滅菌後襬放傾斜，冷卻後即得提純培養基。
步驟（5）中所述原種培養基的製備方法如下：
1）選用當年無蟲優質麥粒60份，提前48小時加水浸泡，同時加入石灰1份，浸泡至無白心時撈出瀝乾水分備用；
2）取木屑30份提前備好用水淋透，自然堆放至棕黃色備用；
3）將上述步驟中製備好的麥粒、木屑以及草炭土8份、石膏1份混合均勻後裝入750ml菌種瓶，裝瓶時裝至瓶身2/3處即可，種瓶上下鬆緊一致，最後用棉花或者塑膠薄膜封口。
在原種培養基中，麥粒富含澱粉和灰分營養更易於菌絲吸收，木屑增加培養基透氣性，易於菌絲生長，草炭土含大量腐殖酸和微量元素增加菌絲活力，能夠有效促進菌核形成，利於羊肚菌菌絲的快速生長。
羊肚菌屬於子囊菌，其生長過程較為複雜，且生長過程中，子囊、菌絲體、子實體形態大小會發生較大變化，其次，不同種的羊肚菌菌種具有不同的培養條件，其生長速度、生長習性、菌核發育、菌絲和菌核的顏色等都有明顯的差異。目前羊肚菌菌種的獲取方法各式各樣，如組織分離、孢子分離、菌土分離等導致品種退化非常嚴重。以上原因導致目前羊肚菌菌種生產的週期長、產量不穩定，甚至絕收，難以滿足市場供應。
本發明的菌種生產由傳統的先生產原種再生產栽培種用於播種，改進為直接生產原種播種，去掉了原種擴繁為栽培種的環節，菌種繁育時間縮短了24～25天，進一步地，改進接種方式，接種方式由1個點位接種改進為2個點位接種，將菌種在試管內的提純培養基生長的時間由10天縮短到6天，再透過改變原種培養方式，將傳統的靜置培養改為搖瓶培養，使得原種培養時間縮短5天以上。因此，本發明的羊肚菌菌種繁育方法有效將傳統的70天縮短到33～36天，大大提升了菌種制種效率，適合在羊肚菌栽培中推廣。
本發明直接採用原種播種，由於減少了種子繁殖代數，避免菌種由於擴繁導致的退化和衰弱，保證了種子活性，其適應性和抗逆性更強，利於羊肚菌播種後的快速生長髮育，提高產量。
與傳統的分離培養基相比，本發明採用了不含葡萄糖的無糖培養基，由於羊肚菌菌絲由組織塊的再生萌發長成，能夠快速附著在培養基表面，而雜菌菌絲必須由芽孢萌發長成，芽孢在無糖培養基表面由於養分不夠很難萌發，減少了雜菌滋生的機會，因而無糖培養基能夠避免菌種被雜菌汙染，使羊肚菌更易存活生長，提高菌種分離的成活率，提高羊肚菌菌種的產量，為做羊肚菌品種的分類鑑定及品種選育奠定了基礎。
本發明透過將菌種分離容器由試管改進為三角瓶，將菌種繁殖數量由8～10支增加到25～30支，大大提高了原種的產量，利於大範圍播種。
本發明與現有技術相比，具有如下的優點和有益效果：
（1）本發明的菌種生產由傳統的先生產原種再生產栽培種用於播種，改進為直接生產原種播種，去掉了原種擴繁為栽培種的環節，大大縮短了菌種制種時間，同時由於減少了種子繁殖代數，保證種子活性，其適應性和抗逆性更強；
（2）透過改進接種方式、改變原種培養方式有效將菌種培養時間縮短9天以上，同時本發明直接採用原種播種，因而整個菌種繁育方法由傳統的70天縮短到33～36天；
（3）透過將菌種分離容器由試管改進為三角瓶，提純培養時菌種繁殖數量由8～10支增加到25～30支，大大提高了繁育出的菌種的產量。
具體實施方式
為使本發明的目的、技術方案和優點更加清楚明白，下面結合實施例，對本發明作進一步的詳細說明，本發明的示意性實施方式及其說明僅用於解釋本發明，並不作為對本發明的限定。
實施例1
一種羊肚菌菌種快速繁育方法，其特徵在於，包括以下步驟：
（1）種菇選擇：採集當地人工種植或野生的羊肚菌，選取菇柄長1～2釐米、菇帽長3～4釐米、紋路清晰、褶皺緊密、菇型勻稱、無蟲無病蟲害的羊肚菌，採菇時將種菇整連根拔除，去掉多餘泥土和雜質，用紙質取樣袋密封，攤晾至含水量60%備用；
（2）無糖培養基製備：取澱粉含量高的土豆，去皮後切成0.9cm3的顆粒，稱取200g，加水1000ml放入鍋內煮沸20分鐘，趁熱過濾後取濾液，向濾液中補充熱水至1000ml後加入瓊脂粉，攪拌溶解後趁熱轉入三角瓶中滅菌，滅菌方法為，將三角瓶直立放在醫用高壓鍋內密封，通電加熱，開啟排氣閥，待鍋內水沸騰持續5分鐘排氣閥均勻排氣時，表示鍋內冷空氣已排盡，關閉排氣閥待溫度上升至120℃時開始計時，維持40分鐘後斷電，滅菌完成後，趁熱取出三角瓶放入超淨工作臺或者接種箱內，消毒後將無糖培養基均勻分裝到平板皿中，冷卻備用；
（3）菌種分離：將種菇、無糖培養基和分離器具置於超淨工作臺中，超淨臺工作20分鐘達到無菌要求後用刀片將種菇菌蓋切開，利用接種鏟取小塊菌肉，接入平板皿中的無糖培養基內，16℃培養4天后即可看到組織塊周圍長出白色稀疏纖細的菌絲，8天后待菌絲長到直徑1.5cm的菌落時即可提純；
（4）接種：從無糖培養基中挑取4mm見方大的培養基2塊，放入試管內的提純培養基的兩個三分點上，每個三角瓶可接28支，16℃下培養1天后即可看到菌種塊周圍長出白色稀疏的菌絲，10天菌絲即可長滿試管，其中，所述提純培養基的製備方法如下：
取20g黃豆打磨成1000ml豆漿後加入葡萄糖20g、瓊脂粉20g、KH2P04 1.5g、MgSO41.5g、酵母膏1g充分溶解，調節PH值為7，採用20mm×200mm的玻璃試管，每個玻璃試管裝入試管高度1/5的溶液，用試管塞封口，滅菌後襬放傾斜，冷卻後即得提純培養基；
（5）羊肚菌原種製作：將試管中長滿菌絲的提純培養基切成0.9cm的片段，每片段接入1瓶滅菌後的原種培養基內，原種培養基溫度降到25℃，接種在接種箱或接種室內進行，一支試管可接8瓶原種，溫度18℃、溼度60%條件下培養，第2天菌絲即可吃料，6天菌絲即可封面，其中，所述原種培養基的製備方法如下：
選用當年無蟲優質麥粒60g，提前48小時加水浸泡，同時加入石灰1g，浸泡至無白心時撈出瀝乾水分備用，取木屑30g提前備好用水淋透，自然堆放至棕黃色備用，將製備好的麥粒、木屑以及草炭土8g、石膏1g混合均勻後裝入750ml菌種瓶，裝瓶時裝至瓶身2/3處即可，種瓶上下鬆緊一致，最後用棉花或者塑膠薄膜封口後，採用高壓滅菌裝置，壓力0.14MPa下滅菌3小時；
（6）搖瓶：菌絲封面後，在培養室內，緊握菌種瓶，上下搖動8～10次，使長有菌絲的麥粒均勻分佈在菌種瓶中，繼續培養5天，菌種瓶中可見大量黃色菌核產生，即可下地播種，每畝用種量400瓶。
實施例2
一種羊肚菌菌種快速繁育方法，其特徵在於，包括以下步驟：
（1）種菇選擇：採集當地人工種植或野生的羊肚菌，選取菇柄長1～2釐米、菇帽長3～4釐米、紋路清晰、褶皺緊密、菇型勻稱、無蟲無病蟲害的羊肚菌，採菇時將種菇整連根拔除，去掉多餘泥土和雜質，用紙質取樣袋密封，攤晾至含水量70%備用；
（2）無糖培養基製備：取澱粉含量高的土豆，去皮後切成1.1cm3的顆粒，稱取200g，加水1000ml放入鍋內煮沸20分鐘，趁熱過濾後取濾液，向濾液中補充熱水至1000ml後加入瓊脂粉，攪拌溶解後趁熱轉入三角瓶中滅菌，滅菌方法為，將三角瓶直立放在醫用高壓鍋內密封，通電加熱，開啟排氣閥，待鍋內水沸騰持續5分鐘排氣閥均勻排氣時，表示鍋內冷空氣已排盡，關閉排氣閥待溫度上升至120℃時開始計時，維持40分鐘後斷電，滅菌完成後，趁熱取出三角瓶放入超淨工作臺或者接種箱內，消毒後將無糖培養基均勻分裝到平板皿中，冷卻備用；
（3）菌種分離：將種菇、無糖培養基和分離器具置於超淨工作臺中，超淨臺工作20分鐘達到無菌要求後用刀片將種菇菌蓋切開，利用接種鏟取小塊菌肉，接入平板皿中的無糖培養基內，18℃培養4天后即可看到組織塊周圍長出白色稀疏纖細的菌絲，7天后待菌絲長到直徑1.5cm的菌落時即可提純；
（4）接種：從無糖培養基中挑取5mm見方大的培養基2塊，放入試管內的提純培養基的兩個三分點上，每個三角瓶可接30支，18℃下培養1天后即可看到菌種塊周圍長出白色稀疏的菌絲，9天菌絲即可長滿試管，其中，所述提純培養基的製備方法如下：
取20g黃豆打磨成1000ml豆漿後加入葡萄糖20g、瓊脂粉20g、KH2P04 1.5g、MgSO41.5g、酵母膏1g充分溶解，調節PH值為7，採用20mm×200mm的玻璃試管，每個玻璃試管裝入試管高度1/5的溶液，用試管塞封口，滅菌後襬放傾斜，冷卻後即得提純培養基；
（5）羊肚菌原種製作：將試管中長滿菌絲的提純培養基切成1.1cm的片段，每片段接入1瓶滅菌後的原種培養基內，原種培養基溫度降到25℃，接種在接種箱或接種室內進行，一支試管可接8瓶原種，溫度16℃、溼度60%條件下培養，第2天菌絲即可吃料，5天菌絲即可封面，其中，所述原種培養基的製備方法如下：
選用當年無蟲優質麥粒60g，提前48小時加水浸泡，同時加入石灰1g，浸泡至無白心時撈出瀝乾水分備用，取木屑30g提前備好用水淋透，自然堆放至棕黃色備用，將製備好的麥粒、木屑以及草炭土8g、石膏1g混合均勻後裝入750ml菌種瓶，裝瓶時裝至瓶身2/3處即可，種瓶上下鬆緊一致，最後用棉花或者塑膠薄膜封口後，採用高壓滅菌裝置，壓力0.14MPa下滅菌3小時；
（6）搖瓶：菌絲封面後，在培養室內，緊握菌種瓶，上下搖動8～10次，使長有菌絲的麥粒均勻分佈在菌種瓶中，繼續培養5天，菌種瓶中可見大量黃色菌核產生，即可下地播種，每畝用種量380瓶。
實施例3
一種羊肚菌菌種快速繁育方法，其特徵在於，包括以下步驟：
（1）種菇選擇：採集當地人工種植或野生的羊肚菌，選取菇柄長1～2釐米、菇帽長3～4釐米、紋路清晰、褶皺緊密、菇型勻稱、無蟲無病蟲害的羊肚菌，採菇時將種菇整連根拔除，去掉多餘泥土和雜質，用紙質取樣袋密封，攤晾至含水量65%備用；
（2）無糖培養基製備：取澱粉含量高的土豆，去皮後切成1.0cm3的顆粒，稱取200g，加水1000ml放入鍋內煮沸19分鐘，趁熱過濾後取濾液，向濾液中補充熱水至1000ml後加入瓊脂粉，攪拌溶解後趁熱轉入三角瓶中滅菌，滅菌方法為，將三角瓶直立放在醫用高壓鍋內密封，通電加熱，開啟排氣閥，待鍋內水沸騰持續5分鐘排氣閥均勻排氣時，表示鍋內冷空氣已排盡，關閉排氣閥待溫度上升至120℃時開始計時，維持40分鐘後斷電，滅菌完成後，趁熱取出三角瓶放入超淨工作臺或者接種箱內，消毒後將無糖培養基均勻分裝到平板皿中，冷卻備用；
（3）菌種分離：將種菇、無糖培養基和分離器具置於超淨工作臺中，超淨臺工作20分鐘達到無菌要求後用刀片將種菇菌蓋切開，利用接種鏟取小塊菌肉，接入平板皿中的無糖培養基內，17℃培養5天后即可看到組織塊周圍長出白色稀疏纖細的菌絲，8天后待菌絲長到直徑1.8cm的菌落時即可提純；
（4）接種：從無糖培養基中挑取5mm見方大的培養基2塊，放入試管內的提純培養基的兩個三分點上，每個三角瓶可接29支，17℃下培養1天后即可看到菌種塊周圍長出白色稀疏的菌絲，9天菌絲即可長滿試管，其中，所述提純培養基的製備方法如下：
取20g黃豆打磨成1000ml豆漿後加入葡萄糖20g、瓊脂粉20g、KH2P04 1.5g、MgSO41.5g、酵母膏1g充分溶解，調節PH值為7，採用20mm×200mm的玻璃試管，每個玻璃試管裝入試管高度1/5的溶液，用試管塞封口，滅菌後襬放傾斜，冷卻後即得提純培養基；
（5）羊肚菌原種製作：將試管中長滿菌絲的提純培養基切成0.9cm的片段，每片段接入1瓶滅菌後的原種培養基內，原種培養基溫度降到25℃，接種在接種箱或接種室內進行，一支試管可接8瓶原種，溫度17℃、溼度60%條件下培養，第2天菌絲即可吃料，7天菌絲即可封面，其中，所述原種培養基的製備方法如下：
選用當年無蟲優質麥粒60g，提前48小時加水浸泡，同時加入石灰1g，浸泡至無白心時撈出瀝乾水分備用，取木屑30g提前備好用水淋透，自然堆放至棕黃色備用，將製備好的麥粒、木屑以及草炭土8g、石膏1g混合均勻後裝入750ml菌種瓶，裝瓶時裝至瓶身2/3處即可，種瓶上下鬆緊一致，最後用棉花或者塑膠薄膜封口後，採用高壓滅菌裝置，壓力0.14MPa下滅菌3小時；
（6）搖瓶：菌絲封面後，在培養室內，緊握菌種瓶，上下搖動8～10次，使長有菌絲的麥粒均勻分佈在菌種瓶中，繼續培養4天，菌種瓶中可見大量黃色菌核產生，即可下地播種，每畝用種量390瓶。
實施例4
一種羊肚菌菌種快速繁育方法，其特徵在於，包括以下步驟：
（1）種菇選擇：採集當地人工種植或野生的羊肚菌，選取菇柄長1～2釐米、菇帽長3～4釐米、紋路清晰、褶皺緊密、菇型勻稱、無蟲無病蟲害的羊肚菌，採菇時將種菇整連根拔除，去掉多餘泥土和雜質，用紙質取樣袋密封，攤晾至含水量70%備用；
（2）無糖培養基製備：取澱粉含量高的土豆，去皮後切成1.1cm3的顆粒，稱取200g，加水1000ml放入鍋內煮沸20分鐘，趁熱過濾後取濾液，向濾液中補充熱水至1000ml後加入瓊脂粉，攪拌溶解後趁熱轉入三角瓶中滅菌，滅菌方法為，將三角瓶直立放在醫用高壓鍋內密封，通電加熱，開啟排氣閥，待鍋內水沸騰持續5分鐘排氣閥均勻排氣時，表示鍋內冷空氣已排盡，關閉排氣閥待溫度上升至120℃時開始計時，維持40分鐘後斷電，滅菌完成後，趁熱取出三角瓶放入超淨工作臺或者接種箱內，消毒後將無糖培養基均勻分裝到平板皿中，冷卻備用；
（3）菌種分離：將種菇、無糖培養基和分離器具置於超淨工作臺中，超淨臺工作20分鐘達到無菌要求後用刀片將種菇菌蓋切開，利用接種鏟取小塊菌肉，接入平板皿中的無糖培養基內，18℃培養4天后即可看到組織塊周圍長出白色稀疏纖細的菌絲，7天后待菌絲長到直徑1.5cm的菌落時即可提純；
（4）接種：從無糖培養基中挑取5mm見方大的培養基2塊，放入試管內的提純培養基的兩個三分點上，每個三角瓶可接29支，18℃下培養1天后即可看到菌種塊周圍長出白色稀疏的菌絲，10天菌絲即可長滿試管，其中，所述提純培養基的製備方法如下：
取20g黃豆打磨成1000ml豆漿後加入葡萄糖20g、瓊脂粉20g、KH2P04 1.5g、MgSO41.5g、酵母膏1g充分溶解，調節PH值為7，採用20mm×200mm的玻璃試管，每個玻璃試管裝入試管高度1/5的溶液，用試管塞封口，滅菌後襬放傾斜，冷卻後即得提純培養基；
（5）羊肚菌原種製作：將試管中長滿菌絲的提純培養基切成1.1cm的片段，每片段接入1瓶滅菌後的原種培養基內，原種培養基溫度降到25℃，接種在接種箱或接種室內進行，一支試管可接8瓶原種，溫度18℃、溼度60%條件下培養，第2天菌絲即可吃料，5天菌絲即可封面，其中，所述原種培養基的製備方法如下：
選用當年無蟲優質麥粒60g，提前48小時加水浸泡，同時加入石灰1g，浸泡至無白心時撈出瀝乾水分備用，取木屑30g提前備好用水淋透，自然堆放至棕黃色備用，將製備好的麥粒、木屑以及草炭土8g、石膏1g混合均勻後裝入750ml菌種瓶，裝瓶時裝至瓶身2/3處即可，種瓶上下鬆緊一致，最後用棉花或者塑膠薄膜封口後，採用高壓滅菌裝置，壓力0.14MPa下滅菌3小時；
（6）搖瓶：菌絲封面後，在培養室內，緊握菌種瓶，上下搖動8～10次，使長有菌絲的麥粒均勻分佈在菌種瓶中，繼續培養5天，菌種瓶中可見大量黃色菌核產生，即可下地播種，每畝用種量385瓶。
實施例5
一種羊肚菌菌種快速繁育方法，其特徵在於，包括以下步驟：
（1）種菇選擇：採集當地人工種植或野生的羊肚菌，選取菇柄長1～2釐米、菇帽長3～4釐米、紋路清晰、褶皺緊密、菇型勻稱、無蟲無病蟲害的羊肚菌，採菇時將種菇整連根拔除，去掉多餘泥土和雜質，用紙質取樣袋密封，攤晾至含水量70%備用；
（2）無糖培養基製備：取澱粉含量高的土豆，去皮後切成1.1cm3的顆粒，稱取200g，加水1000ml放入鍋內煮沸18分鐘，趁熱過濾後取濾液，向濾液中補充熱水至1000ml後加入瓊脂粉，攪拌溶解後趁熱轉入三角瓶中滅菌，滅菌方法為，將三角瓶直立放在醫用高壓鍋內密封，通電加熱，開啟排氣閥，待鍋內水沸騰持續5分鐘排氣閥均勻排氣時，表示鍋內冷空氣已排盡，關閉排氣閥待溫度上升至120℃時開始計時，維持40分鐘後斷電，滅菌完成後，趁熱取出三角瓶放入超淨工作臺或者接種箱內，消毒後將無糖培養基均勻分裝到平板皿中，冷卻備用；
（3）菌種分離：將種菇、無糖培養基和分離器具置於超淨工作臺中，超淨臺工作20分鐘達到無菌要求後用刀片將種菇菌蓋切開，利用接種鏟取小塊菌肉，接入平板皿中的無糖培養基內，16℃培養5天后即可看到組織塊周圍長出白色稀疏纖細的菌絲，7天后待菌絲長到直徑2cm的菌落時即可提純；
（4）接種：從無糖培養基中挑取4mm見方大的培養基2塊，放入試管內的提純培養基的兩個三分點上，每個三角瓶可接30支，18℃下培養1天后即可看到菌種塊周圍長出白色稀疏的菌絲，9天菌絲即可長滿試管，其中，所述提純培養基的製備方法如下：
取20g黃豆打磨成1000ml豆漿後加入葡萄糖20g、瓊脂粉20g、KH2P04 1.5g、MgSO41.5g、酵母膏1g充分溶解，調節PH值為7，採用20mm×200mm的玻璃試管，每個玻璃試管裝入試管高度1/5的溶液，用試管塞封口，滅菌後襬放傾斜，冷卻後即得提純培養基；
（5）羊肚菌原種製作：將試管中長滿菌絲的提純培養基切成0.9cm的片段，每片段接入1瓶滅菌後的原種培養基內，原種培養基溫度降到25℃，接種在接種箱或接種室內進行，一支試管可接8瓶原種，溫度17℃、溼度60%條件下培養，第2天菌絲即可吃料，6天菌絲即可封面，其中，所述原種培養基的製備方法如下：
選用當年無蟲優質麥粒60g，提前48小時加水浸泡，同時加入石灰1g，浸泡至無白心時撈出瀝乾水分備用，取木屑30g提前備好用水淋透，自然堆放至棕黃色備用，將製備好的麥粒、木屑以及草炭土8g、石膏1g混合均勻後裝入750ml菌種瓶，裝瓶時裝至瓶身2/3處即可，種瓶上下鬆緊一致，最後用棉花或者塑膠薄膜封口後，採用高壓滅菌裝置，壓力0.14MPa下滅菌3小時；
（6）搖瓶：菌絲封面後，在培養室內，緊握菌種瓶，上下搖動8～10次，使長有菌絲的麥粒均勻分佈在菌種瓶中，繼續培養5天，菌種瓶中可見大量黃色菌核產生，即可下地播種，每畝用種量400瓶。
經發明人大量的試驗和探索，最終得出上述羊肚菌菌種快速繁育方法，該方法在保證菌種品質、存活率和產量的前提下，大大縮短了羊肚菌菌種繁育週期，滿足市場需求。
以上所述的具體實施方式，對本發明的目的、技術方案和有益效果進行了進一步詳細說明，所應理解的是，以上所述僅為本發明的具體實施方式而已，並不用於限定本發明的保護範圍，凡在本發明的精神和原則之內，所做的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護範圍之內。