首先要有好的大腸桿菌感受態種子，一般買一管商業化的也不貴挺多十幾塊錢。
參考分子克隆的步驟進行大腸桿菌感受態的製備。具體步驟如下:
1 劃線，商業化的大腸桿菌種子在無抗性的LB平板劃線，37攝氏度過夜培養。
2 挑取單克隆，於50ml LB培養基中培養，37℃,220rpm培養大約7～8小時。
3 測一下OD600～0.6-0.8，先將菌液冰浴10分鐘，4℃離心收菌，4500rpm，10分鐘。
4 洗滌細胞:棄掉上一步的上清，用5ml鹽溶液(氯化鈣和氯化鎂混合液)重懸細胞，冰浴10分鐘。
5 離心4℃，4500rpm，10分鐘，收集細胞，棄上清。用1.5ml細胞儲存液(氯化鈣和甘油)重懸細胞。
6 分裝，將上述重懸液分裝每個100微升。先用液氮速凍，然後保存於-80攝氏度備用。
注意:以上操作在無菌低溫條件下操作，以上是化學法轉化感受態，若要製備電轉感受態，步驟4和5全部改用10%甘油溶液。
首先要有好的大腸桿菌感受態種子，一般買一管商業化的也不貴挺多十幾塊錢。
參考分子克隆的步驟進行大腸桿菌感受態的製備。具體步驟如下:
1 劃線，商業化的大腸桿菌種子在無抗性的LB平板劃線，37攝氏度過夜培養。
2 挑取單克隆，於50ml LB培養基中培養，37℃,220rpm培養大約7～8小時。
3 測一下OD600～0.6-0.8，先將菌液冰浴10分鐘，4℃離心收菌，4500rpm，10分鐘。
4 洗滌細胞:棄掉上一步的上清，用5ml鹽溶液(氯化鈣和氯化鎂混合液)重懸細胞，冰浴10分鐘。
5 離心4℃，4500rpm，10分鐘，收集細胞，棄上清。用1.5ml細胞儲存液(氯化鈣和甘油)重懸細胞。
6 分裝，將上述重懸液分裝每個100微升。先用液氮速凍，然後保存於-80攝氏度備用。
注意:以上操作在無菌低溫條件下操作，以上是化學法轉化感受態，若要製備電轉感受態，步驟4和5全部改用10%甘油溶液。