開始在細胞繫上面做，敲低後腫瘤細胞生長遷移等能力都下降了。然後裸鼠成瘤，也是同樣的結果。想看看過表達的情況，結果和敲低的一樣。百思不得其解，不知道往下怎麼做了。
回覆列表
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1 # 免疫平衡感
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2 # 神奇的細胞生物學
其實也沒什麼奇怪，我至少發現過兩個這樣的例子。似乎有些基因的表達必須維持在一個合適的水平，過高或過低都會導致同樣的細胞學效應。過量表達或者干涉/敲除可能分別透過直接或間接的效應導致了同樣的結果。
儘管可以做如上的解釋，事實上大部分時候還是實驗本身的問題，過表達或干涉的結果一定solid麼？也許還要再重複確認吧
首先，確認結果。在細胞繫上分別做敲低和過表達，在小鼠成瘤實驗中也分別做敲低和過表達，如果真的這四個實驗的結果都是腫瘤的增殖減緩，那麼恭喜你你做出了一個好表型，已經具備了發大文章的前提。
第二步，在上述四個實驗中蛋白水平和mRNA水平都去檢測你做的基因是否真的被敲低或過表達了。
第三步，如果結果是真的，那就要深入分析一下了。樓主提供的資訊比較少，我只能簡單說說我的猜測，可以私下再深入探討。（1）該基因的表達產物是否有與之拮抗的蛋白。有可能A降低導致 B 的顯著上調，B的功能與A相反，而 A 過表達時就體現出A的功能。（2）建議關注一下細胞週期的變化，看各時期細胞的比例在過表達和敲低時變化是否一致。對調節某個特定週期有影響的蛋白，過表達或敲低時可能會出現這種情況。