1.純化siRNA siRNA的濃度和純度對轉染實驗非常重要。為得到高純度的siRNA，推薦用玻璃纖維結合，洗脫或透過15-20%丙烯醯胺膠除去反應中多餘的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和鹽離子。注意：化學合成的RNA通常需要跑膠電泳純化（即PAGE膠純化）。 2.避免RNA酶汙染 微量的RNA酶將導致siRNA轉染實驗失敗。由於實驗環境中RNA酶普遍存在，如面板，頭髮，所有徒手接觸過的物品或暴露在空氣中的物品等，因此保證實驗中的每個環節不受RNA酶汙染非常重要。 3.健康的細胞培養物和嚴格的操作確保轉染的重複性 通常，健康的細胞轉染效率較高。此外，較低的傳代數能確保每次實驗所用細胞的穩定性。為了最佳化實驗，推薦用50代以下的轉染細胞，否則細胞轉染效率會隨時間明顯下降。 4.選擇合適的轉染試劑 針對siRNA製備方法以及靶細胞型別的不同，選擇好的轉染試劑和最佳化的操作對siRNA實驗的成功至關重要。如Entranster-R4000，專門針對siRNA等RNA轉染。
1.首先要準備所需的材料①轉染的核酸，如siRNA，miRNA，mimic、inhibitor，也可以轉染DNA。
②轉染試劑和動物。
2.試劑的使用量
1.純化siRNA siRNA的濃度和純度對轉染實驗非常重要。為得到高純度的siRNA，推薦用玻璃纖維結合，洗脫或透過15-20%丙烯醯胺膠除去反應中多餘的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和鹽離子。注意：化學合成的RNA通常需要跑膠電泳純化（即PAGE膠純化）。 2.避免RNA酶汙染 微量的RNA酶將導致siRNA轉染實驗失敗。由於實驗環境中RNA酶普遍存在，如面板，頭髮，所有徒手接觸過的物品或暴露在空氣中的物品等，因此保證實驗中的每個環節不受RNA酶汙染非常重要。 3.健康的細胞培養物和嚴格的操作確保轉染的重複性 通常，健康的細胞轉染效率較高。此外，較低的傳代數能確保每次實驗所用細胞的穩定性。為了最佳化實驗，推薦用50代以下的轉染細胞，否則細胞轉染效率會隨時間明顯下降。 4.選擇合適的轉染試劑 針對siRNA製備方法以及靶細胞型別的不同，選擇好的轉染試劑和最佳化的操作對siRNA實驗的成功至關重要。如Entranster-R4000，專門針對siRNA等RNA轉染。