emphasis:role=italicE.coliemphasis:DNA聚合酶I為單鏈多肽,分子量109ku,有四種活性。(1)5′→3′DNA聚合酶活性:反應底物為單鏈DNA及引物(帶3′-OH基)或5′突出的雙鏈DNA。
(2)5′→3′外切核酸酶活性:反應底物是雙鏈DNA或DNA∶RNA雜交體,它可從5′端降解雙鏈DNA,也降解RNA∶DNA中的RNA(RNase:H活性)。
(3)3′→5′外切酶活性:反應底物是帶3′-OH的雙鏈DNA或單鏈DNA,其活性從3′-OH端降解DNA,可被5′→3′聚合活性封閉,也可被帶5′磷酸的dNMP所抑制。
(4)交換(置換)反應:如果只有一種dNTP存在,3′→5′外切活性將從3′-OH端降解DNA,然後在該位置發生一系列連續的合成和外切反應,直到露出與該dNTP互補的鹼基。
總之,在沒有dNTP的情況下,外切活性占主導地位,而當存在足夠的dNTP時,外切活性和合成活性將處在動態平衡中,結果使得雙鏈DNA成為平末端。
emphasis:role=italicE.coliemphasis:DNA聚合酶I為單鏈多肽,分子量109ku,有四種活性。(1)5′→3′DNA聚合酶活性:反應底物為單鏈DNA及引物(帶3′-OH基)或5′突出的雙鏈DNA。
(2)5′→3′外切核酸酶活性:反應底物是雙鏈DNA或DNA∶RNA雜交體,它可從5′端降解雙鏈DNA,也降解RNA∶DNA中的RNA(RNase:H活性)。
(3)3′→5′外切酶活性:反應底物是帶3′-OH的雙鏈DNA或單鏈DNA,其活性從3′-OH端降解DNA,可被5′→3′聚合活性封閉,也可被帶5′磷酸的dNMP所抑制。
(4)交換(置換)反應:如果只有一種dNTP存在,3′→5′外切活性將從3′-OH端降解DNA,然後在該位置發生一系列連續的合成和外切反應,直到露出與該dNTP互補的鹼基。
總之,在沒有dNTP的情況下,外切活性占主導地位,而當存在足夠的dNTP時,外切活性和合成活性將處在動態平衡中,結果使得雙鏈DNA成為平末端。