一般而言大部分物質被激發後會先弛豫到S1態然後再弛豫到基態(S0態度)，只要是激發光沒有將物質光解，那麼無論激發波長是多少（當然,激發光需能夠將物質激發到電子激發態），同一物質最後檢測到的熒光光譜的形狀通常是一致的。根據Kasha"s Rule指出，在凝聚相（液相、固相）只能觀測到從S1態發出的熒光。也就是說,在凝聚相中，處於Sn態(n > 1)的物質的壽命很短，弛豫得很快，會迅速回到S1態，進而從S1態再向S0態躍遷而發出熒光。擴充套件資料：高強度鐳射能夠使吸收物質中相當數量的分子提升到激發量子態極大地提高了熒光光譜的靈敏度。以鐳射為光源的熒光光譜適用於超低濃度樣品的檢測。例如用氮分子鐳射泵浦的可調染料鐳射器對熒光素鈉的單脈衝檢測限已達到10-10摩爾/升，比用普通光源得到的最高靈敏度提高了一個數量級。鐳射波長對雜散光及信噪比的影響十分顯著，當狹縫寬度不變時，用氬鐳射514.5nm比用488.0nm波長激發樣品，雜散光要小一到二個數量級（±100cm-1範圍內），並且解析度有所提高。