回覆列表
  • 1 # 指尖時

    如何使用miranda進行mirna進行靶基因預測

    目前更先進的方法是透過紫外線照射以交聯複合物,然後開展深度測序以鑑定發現的RNA,這種方法被稱為紫外交聯免疫沉澱結合高通量測序(HITS-CLIP),或CLIP-seq。利用這種方法來尋找miRNA的靶基因,能夠明顯降低miRNA結合位點的假陽性預測率,並且縮小miRNA結合位點的空間範圍,可在全基因組範圍內鑑定AGO蛋白與不同RNA上的結合。

    Clontech公司(Takara旗下)也推出了一種新工具,能協助鑑定細胞中的miRNA靶點。這一工具名為MirTrap系統。它利用RISC蛋白的顯性失活突變體,允許miRNA與其目標結合,但限制進一步的加工。此亞基整合到內源的Argonaute/RISC複合物中,並“鎖定”miRNA-目標mRNA。顯性失活亞基上的DYKDDDDK(FLAG表位)標籤有助於整個Ago/RISC複合物的捕獲和分離。這樣就能實現miRNA及其目標的免疫沉澱,從而透過新一代測序或定量PCR來鑑定或定量。

  • 中秋節和大豐收的關聯?
  • 為什麼要選擇跨境電商,它的優勢在哪裡?