《最後的晚餐》取材於《新約聖經》。據《新約聖經·馬可福音》記載：耶穌最後一次到耶路撒冷去過逾越節，猶太教祭司長陰謀在夜間逮捕他，但苦於無人帶路。正在這時，耶穌的門徒猶大向猶太教祭司長告密說："我把他交給你們，你們願意給我多少錢？"猶太教祭司長就給了猶大30塊錢。於是，猶大跟祭司長約好：他親吻的那個人就是耶穌。逾越節那天，耶穌跟12個門徒坐在一起，共進最後一次晚餐，他憂鬱地對12個門徒說："我實話告訴你們，你們中有一個人要出賣我了！"12個門徒聞言後，或震驚、或憤怒、或激動、或緊張。《最後的晚餐》表現的就是這一時刻的緊張場面。畫中人物從左到右是：巴多羅買(Bartholomeus)、小雅各(Jacobus Alphei)、安德烈(Andreas)、叛徒猶大(Judas Scariotes)、西門彼得(伯多祿 Simon Petrus)、約翰(若望 Iohannes Zebedaei)、耶穌( Jesus)、多馬(多默 Thomas)、大雅各(Jacobus Zebedaei)、腓力(Philippus)、馬太(瑪竇 Mattheus)、奮銳黨的西門(熱誠者西滿 Simon Cananeus)、達太(聖猶大 Thaddeus)。