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  • 1 # 南風微涼一夢味少

    通常,此法中的mtt濃度為5mg/ml。因此,可以稱取mtt0.5克,溶於100ml的磷酸緩衝液(pbs)或無酚紅的培養基中,用0.22μm濾膜過濾以除去溶液裡的細菌,放4℃避光儲存即可。在配製和儲存的過程中,容器最好用鋁箔紙包住。

    需要注意的是,mtt法只能用來檢測細胞相對數和相對活力,但不能測定細胞絕對數。在用酶標儀檢測結果的時候,為了保證實驗結果的線性,mtt吸光度最好在0-0.7範圍內。

    mtt一般最好現用現配,過濾後4℃避光儲存兩週內有效,或配製成5mg/ml儲存在-20度長期儲存,避免反覆凍融,最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。我一般都把mtt粉分裝在ep管裡,用的時候現配,直接往培養板中加,沒必要一下子配那麼多,尤其當mtt變為灰綠色時就絕對不能再用了。

    mtt有致癌性,用的時候小心,有條件最好帶那種透明的簿膜手套.配成的mtt需要無菌,mtt對菌很敏感;往96孔板加時不避光也沒有關係,畢竟時間較短,或者你不放心的時候可以把操作檯上的照明燈關掉.

    ……

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