就是將誘變處理的野生型菌株塗布在含有末端代謝產物的結構類似物的瓊脂平板上，培養一段時間之後大多數細胞被殺死，而那些形成了抗性突變的君主則形成了菌落，從而得到不受末端代謝產物調節作用的突變株。機制如下：細胞中過量代謝產物（氨基酸A）會抑制和阻遏參與其生物合成途徑的酶。氨基酸A可用於蛋白質的合成，氨基酸類似物A*（又稱抗代謝物），具有與氨基酸A一樣的調節作用，但不能用於合成蛋白質。經誘變處理的野生型在含有氨基酸類似物A*的培養基中培養時，因為絕大多數細胞不能合成氨基酸A而死亡，只有那些對類似物A*不敏感的抗性突變菌株能合成氨基酸A，方能形成菌落。在這些突變菌株中，有些可能是由於參與氨基酸合成的酶結構起了變化，對類似物A*不敏感（抗反饋抑制的突變株），另一些可能是編碼參與氨基酸A合成酶的操縱子控制基因發生了突變，編碼出沒有活性的調節蛋白而對類似物A*不敏感（抗反饋阻遏的突變株）。由於這些君主對氨基酸A的合成失去控制，從而能過量的生產氨基酸A。如篩選能抗蘇氨酸的結構類似物α-氨基-β-羥基戊酸的黃色短桿菌的突變株獲得蘇氨酸過量合成型菌株。此種方法可用於過量合成氨基酸、嘌呤、嘧啶和維生素。