採用高壓滅菌，每次使用前必須向鍋內加水，加入量以達到水位標記為度。切忌空燒或加水不足導致中途燒乾而引起爆炸事故。放入鍋內滅菌的培養基、物料等，排放時需留有縫隙，使蒸汽暢通。如果疊放得過於緊密，將阻礙蒸汽穿透，造成物料內外溫度不均勻，形成“死角”，致使滅菌不徹底。加熱滅菌時，先開啟排氣閥，使鍋內冷空氣排出，當水沸騰時，大量蒸汽從排氣閥中衝出，冷空氣被排盡，即可關閉排氣閥。若滅菌鍋內冷空氣未排盡，則它受熱後很快膨脹，壓力上升，使壓力與溫度形成差異，這時雖然壓力達到，而溫度達不到規定的要求，產生壓力雖高而實際滅菌溫度低的假壓現象，致使滅菌不徹底。排除冷空氣也可採用集中排氣法，即當壓力達到0.049兆帕時開啟排氣閥排氣，壓力降到零再關閉排氣閥升壓滅菌。後一種方法只適合器皿、刀具、棉織物、口罩等，而料瓶、料袋，特別是液體培養基等不宜採用。因為容易造成袋膜脹破、瓶塞脫落、液體沸騰外溢。滅菌結束後，一般應自然緩慢降壓。若排氣太快鍋內產生負壓，瓶、袋內壓力大於鍋內壓力，這與集中放氣一樣會造成料袋鼓氣膨脹而拉薄脹破或液體外溢等情況發生。
採用高壓滅菌，每次使用前必須向鍋內加水，加入量以達到水位標記為度。切忌空燒或加水不足導致中途燒乾而引起爆炸事故。放入鍋內滅菌的培養基、物料等，排放時需留有縫隙，使蒸汽暢通。如果疊放得過於緊密，將阻礙蒸汽穿透，造成物料內外溫度不均勻，形成“死角”，致使滅菌不徹底。加熱滅菌時，先開啟排氣閥，使鍋內冷空氣排出，當水沸騰時，大量蒸汽從排氣閥中衝出，冷空氣被排盡，即可關閉排氣閥。若滅菌鍋內冷空氣未排盡，則它受熱後很快膨脹，壓力上升，使壓力與溫度形成差異，這時雖然壓力達到，而溫度達不到規定的要求，產生壓力雖高而實際滅菌溫度低的假壓現象，致使滅菌不徹底。排除冷空氣也可採用集中排氣法，即當壓力達到0.049兆帕時開啟排氣閥排氣，壓力降到零再關閉排氣閥升壓滅菌。後一種方法只適合器皿、刀具、棉織物、口罩等，而料瓶、料袋，特別是液體培養基等不宜採用。因為容易造成袋膜脹破、瓶塞脫落、液體沸騰外溢。滅菌結束後，一般應自然緩慢降壓。若排氣太快鍋內產生負壓，瓶、袋內壓力大於鍋內壓力，這與集中放氣一樣會造成料袋鼓氣膨脹而拉薄脹破或液體外溢等情況發生。