發光是因為用了發光物質標記的。 利用液氮對組織進行研磨,從而破碎細胞。細胞提取液中含有的SDS溶解膜蛋白而破壞細胞膜,使蛋白質變性而沉澱下來。EDTA抑制DNA酶的活性。再用酚、氯仿抽提的方法去除蛋白,得到的DNA溶液經乙醇沉澱。 取4g新鮮葉片,在液氮中研磨成粉末狀(越細越好)。 2.轉移至50mL離心管中,加人16mL細胞提取液,充分混勻。65 ℃水浴保溫20min。 3.從水浴中取出離心管,加人5mL5mol/LKCl溶液,混勻,冰浴20 min。 4.4000r/min離心20min。 5.將上清液轉移到另一50mL離心管中。 6.加等體積酚/氯仿混勻,12OO0r/min離心5min,取上清。 7.加等體積氯仿,混勻,12000r/min,離心5min,取上清。 8.加人0.6-1倍體積的異丙醇(沉澱DNA),混勻。 9.離心獲得沉澱,70%乙醇洗3次。風乾沉澱。 10.加人500μLTE緩衝液,溶解DNA。 11.取3μL上清液,瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA濃度、質量。 最後用EB跑電泳就可以看到你在電視上看到的發光的dna了
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