熒光絕對定量中標準品：指用含有目的基因的質粒，知道質粒的分子量和濃度計算出複製數，然後倍比稀釋就作為絕對定量的標準品。　　獲取：把目的基因p出來，然後接到質粒上，轉染搖菌擴增，然後再抽質粒，酶切純化。最後把純化的目的基因做個鑑定。然後測定目的基因的量，計算出複製數。　　熒光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR) 是1996 年由美國Applied Biosystems 公司推出的一種新定量試驗技術，它是透過熒光染料或熒游標記的特異性的探針，對PCR產物進行標記跟蹤，實時線上監控反應過程，結合相應的軟體可以對產物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度。　　PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發射的熒光訊號被淬滅基團吸收；剛開始時, 探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監測系統可接收到熒光訊號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現了熒光訊號的累積與PCR產物形成完全同步。