師兄用的晶安生物的細胞爬片。晶安生物細胞爬片免疫組化法： 1 胰酶消化細胞，收集至離心管；調整樣本細胞數為1×106 /ml； 2 將單細胞懸液滴加至平皿內無菌載玻片表面，置於37℃ 5%的加溼CO2孵箱中過夜，使細胞爬片。 3 吸棄平皿內培養上清，加入新鮮培養基，用無菌培養基洗3次； 4 PBS沖洗相應方案的載玻片3次； 5 將載玻片置於95%乙醇中固定約1h； 6 倒置相差顯微鏡下觀察，並劃定載玻片上細胞爬片密集區； 7 在相應區域滴加按一定比例稀釋後一抗，4℃冰箱內過夜溼孵。陰性對照以PBS緩衝液代替一抗。 8 先暫復溫30min，後PBS沖洗載玻片3次； 9 滴加二抗，室溫溼孵30min；後PBS沖洗載玻片3次； 10 DAB顯色：將配置好的DAB溶液滴加至載玻片上，室溫下孵育3min至載玻片略顯黃色； 11 清水充分沖洗載玻片，蘇木素復染核3-5min，清水沖洗，鹽酸酒精分化20s，清水沖洗，氨水返藍3min，清水沖洗，後置於75%-80%-95%-無水酒精中脫水，每步驟約2min； 12 將載玻片置於1、2、3道二甲苯中，各約15min，中性樹脂封片，置於陰涼通風處風乾。
師兄用的晶安生物的細胞爬片。晶安生物細胞爬片免疫組化法： 1 胰酶消化細胞，收集至離心管；調整樣本細胞數為1×106 /ml； 2 將單細胞懸液滴加至平皿內無菌載玻片表面，置於37℃ 5%的加溼CO2孵箱中過夜，使細胞爬片。 3 吸棄平皿內培養上清，加入新鮮培養基，用無菌培養基洗3次； 4 PBS沖洗相應方案的載玻片3次； 5 將載玻片置於95%乙醇中固定約1h； 6 倒置相差顯微鏡下觀察，並劃定載玻片上細胞爬片密集區； 7 在相應區域滴加按一定比例稀釋後一抗，4℃冰箱內過夜溼孵。陰性對照以PBS緩衝液代替一抗。 8 先暫復溫30min，後PBS沖洗載玻片3次； 9 滴加二抗，室溫溼孵30min；後PBS沖洗載玻片3次； 10 DAB顯色：將配置好的DAB溶液滴加至載玻片上，室溫下孵育3min至載玻片略顯黃色； 11 清水充分沖洗載玻片，蘇木素復染核3-5min，清水沖洗，鹽酸酒精分化20s，清水沖洗，氨水返藍3min，清水沖洗，後置於75%-80%-95%-無水酒精中脫水，每步驟約2min； 12 將載玻片置於1、2、3道二甲苯中，各約15min，中性樹脂封片，置於陰涼通風處風乾。