乳酸菌的分離純化
取市場銷售的新鮮的酸奶,分別用接種針接入BCG牛培養基瓊脂平板上,40℃培養48h,如出現圓形稍扁平的黃色菌落及其周圍培養基變為黃色者初步定為乳酸菌。
選取乳酸菌典型菌落轉致脫脂乳試管中,40℃培養8~24h若牛乳出現凝固,無氣泡,顯酸性,塗片鏡檢細胞桿狀或鏈球狀,革蘭氏染色顯陽性,則可將其連續傳代3次,最終選擇出在3~6h能凝固的牛乳管,作菌種待用。
附加:1BCG牛乳培養基配方及滅菌
(A)液:脫脂奶粉10克,水50ml,加入1.6%溴甲酚綠乙醇溶液1ml,80℃滅菌20min。
(B)液:酵母膏1克,水50克,瓊脂2克,pH6.8,121℃滅菌2.min。
按照配方正確稱取所需藥品放於燒杯中,在搪瓷杯中加入所需水量,玻棒攪勻,加熱溶解,用1N NaOH或1N HCl調pH,用pH試紙對照,加瓊脂溶化,加熱過程要不斷攪拌,可適當補水。瓊脂完全溶解後倒入250mL的錐形瓶中,用紗布包紮好(注意不要汙染紗布)
再用牛皮紙包紮,貼上標籤(必須用鉛筆寫),註明何種培養基。在高壓鍋中,在1kg/cm2壓力下維持30min。
乳酸菌的分離純化
取市場銷售的新鮮的酸奶,分別用接種針接入BCG牛培養基瓊脂平板上,40℃培養48h,如出現圓形稍扁平的黃色菌落及其周圍培養基變為黃色者初步定為乳酸菌。
選取乳酸菌典型菌落轉致脫脂乳試管中,40℃培養8~24h若牛乳出現凝固,無氣泡,顯酸性,塗片鏡檢細胞桿狀或鏈球狀,革蘭氏染色顯陽性,則可將其連續傳代3次,最終選擇出在3~6h能凝固的牛乳管,作菌種待用。
附加:1BCG牛乳培養基配方及滅菌
(A)液:脫脂奶粉10克,水50ml,加入1.6%溴甲酚綠乙醇溶液1ml,80℃滅菌20min。
(B)液:酵母膏1克,水50克,瓊脂2克,pH6.8,121℃滅菌2.min。
按照配方正確稱取所需藥品放於燒杯中,在搪瓷杯中加入所需水量,玻棒攪勻,加熱溶解,用1N NaOH或1N HCl調pH,用pH試紙對照,加瓊脂溶化,加熱過程要不斷攪拌,可適當補水。瓊脂完全溶解後倒入250mL的錐形瓶中,用紗布包紮好(注意不要汙染紗布)
再用牛皮紙包紮,貼上標籤(必須用鉛筆寫),註明何種培養基。在高壓鍋中,在1kg/cm2壓力下維持30min。