細胞傳代密度均勻，有以下3點比較重要（齊氏生物推薦參考丁香通網友回答） 1.儘量消化細胞分散成單細胞懸液。對於易於消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。我見過有些剛進實驗室的師弟師妹，一上來就加1-2ml胰酶，結果細胞團大片脫落，雖然有後續吹打步驟，但我覺得效果不佳。至於難消化的細胞，怎麼掌握分寸，還待自己摸索或其他戰友分享。 2.在以上基礎上，我覺得細胞吹勻，這步比上述提到的十字移動等更為重要。如傳代1:4 ,可以收集所有細胞至離心管，加入培養液重懸混勻，吸管緩慢吹打20-30次，可配合水平搖晃離心管。 3.此外我覺得培養液的量可能也會有講究，如6孔板中你最終加入2ml細胞懸液，尤其像這樣的小面積培養皿，液體表面有張力，細胞易於聚集在中間，所以我一般6孔板再加1ml以消除影響，吸管緩慢吹打15-20次左右繼續混勻。