因為不同的限制性內切酶會主動識別不同的切點，不同的切點處在不同的鹼基處。所以用兩種內切酶會產生兩種不同的粘性末端。如果用一種切割會造成兩種目的基因粘性末端相同，無法區分開來。再者，限制酶還不能破壞標記基因。
用不同的限制酶切兩端，防止載體自連或目的基因自連。
限制性內切酶能識別特定的脫氧核苷酸序列，並於特定位點上準確切割雙鏈dna。可以用它來檢測基因變異，檢測基因存在與否和位置。限制酶具有專一性，一種限制性內切酶智慧識別一種脫氧核苷酸序列。
擴充套件資料：
限制性內切酶（restriction endonuclease）也稱限制性酶（restriction enzyme），是由W. Arber，H. Smith和D. Nathans等人（1979年）從細菌中分離的一類酶。限制酶具有極高的專一性，識別雙鏈DNA上特定的位點，將兩條鏈都切斷，形成粘末端或平末端。
限制酶可以用來解剖纖細的DNA分子，在分析染色體結構、製作DNA的限制酶譜、測定較長的DNA序列、基因的分離、基因的體外重組等研究中是不可缺少的工具。對於研究DNA的分子生物學家來說，這是一把天賜神刀——分子生物刀。
因為不同的限制性內切酶會主動識別不同的切點，不同的切點處在不同的鹼基處。所以用兩種內切酶會產生兩種不同的粘性末端。如果用一種切割會造成兩種目的基因粘性末端相同，無法區分開來。再者，限制酶還不能破壞標記基因。
用不同的限制酶切兩端，防止載體自連或目的基因自連。
限制性內切酶能識別特定的脫氧核苷酸序列，並於特定位點上準確切割雙鏈dna。可以用它來檢測基因變異，檢測基因存在與否和位置。限制酶具有專一性，一種限制性內切酶智慧識別一種脫氧核苷酸序列。
擴充套件資料：
限制性內切酶（restriction endonuclease）也稱限制性酶（restriction enzyme），是由W. Arber，H. Smith和D. Nathans等人（1979年）從細菌中分離的一類酶。限制酶具有極高的專一性，識別雙鏈DNA上特定的位點，將兩條鏈都切斷，形成粘末端或平末端。
限制酶可以用來解剖纖細的DNA分子，在分析染色體結構、製作DNA的限制酶譜、測定較長的DNA序列、基因的分離、基因的體外重組等研究中是不可缺少的工具。對於研究DNA的分子生物學家來說，這是一把天賜神刀——分子生物刀。