梯度洗脫裝置分兩種:高壓梯度:用兩臺高壓輸液泵將兩種溶劑輸入低壓梯度:在常壓下將兩種溶劑(或多元溶劑)混合,然後用高壓輸液泵將流動相輸入到色譜柱中。梯度洗脫可提高分離度、縮短分離時間、降低最小檢測量和提高分離精度。但在使用中,梯度洗脫也有許多與等度洗脫不同的地方需要注意。梯度洗脫時應注意:
1、注意各溶劑間的互溶性。
2、對溶劑的純度要求更高(影響重現性)。
3、注意梯度變化時系統壓力的變化,防止超出限度。
4、梯度結束後,用初始流動相沖洗,使柱子平衡一段時間(再生),使系統回覆到初始狀態。(梯度週期)5、低壓梯度要注意脫氣,混合後容易產生氣泡。6、容易出現鬼峰,應作空白試驗。7、梯度選擇時儘量幾相之間相變化要小,否則不易平衡。8、梯度洗脫應使用對流動相組成變化不敏感的選擇性檢測器(如紫外吸收檢測器或熒光檢測器),而不能使用對流動相組成變化敏感的通用型檢測器(如示差折光檢測器)。9、要注意水相中鹽的濃度,防止在有機相提升過程中鹽的析出。
梯度洗脫裝置分兩種:高壓梯度:用兩臺高壓輸液泵將兩種溶劑輸入低壓梯度:在常壓下將兩種溶劑(或多元溶劑)混合,然後用高壓輸液泵將流動相輸入到色譜柱中。梯度洗脫可提高分離度、縮短分離時間、降低最小檢測量和提高分離精度。但在使用中,梯度洗脫也有許多與等度洗脫不同的地方需要注意。梯度洗脫時應注意:
1、注意各溶劑間的互溶性。
2、對溶劑的純度要求更高(影響重現性)。
3、注意梯度變化時系統壓力的變化,防止超出限度。
4、梯度結束後,用初始流動相沖洗,使柱子平衡一段時間(再生),使系統回覆到初始狀態。(梯度週期)5、低壓梯度要注意脫氣,混合後容易產生氣泡。6、容易出現鬼峰,應作空白試驗。7、梯度選擇時儘量幾相之間相變化要小,否則不易平衡。8、梯度洗脫應使用對流動相組成變化不敏感的選擇性檢測器(如紫外吸收檢測器或熒光檢測器),而不能使用對流動相組成變化敏感的通用型檢測器(如示差折光檢測器)。9、要注意水相中鹽的濃度,防止在有機相提升過程中鹽的析出。