蘑菇二級種（原種）、三級種（栽培種）通常是採用糞草培養基和麥粒培養基。二級種以750毫升菌種瓶為容器。三級種以菌瓶或菌袋為容器。為確保菌種生長髮育良好，在培養基選料和配製上必須把握好以下事項：
（1）拌料①按配方的比例稱取所需原料，把蔗糖溶入水中，預溼發酵麥稈（稻草）和發酵牛糞粉，把麥皮、碳酸鈣撒入，反覆攪拌均勻，至含水量62%～65%。
②將麥粒稱量，浸泡或水煮至熟透無白心，拌入牛糞粉10%，碳酸鈣2%。
（2）裝瓶（袋）
①把配製好的糞草培養料裝入750毫升的菌種瓶中，料裝至瓶肩，後壓實，表面按平，裝料後將瓶內外壁和瓶口擦淨，塞棉塞。菌種袋常用15釐米×30釐米規格柱形袋，袋口有套環和棉塞，二級種菌瓶（袋）中部不打穴，三級種中心可打穴。
②把配製好的麥粒牛糞培養料裝入750毫升的菌種瓶中，料裝至瓶肩，後壓實，有的為防止菌瓶中麥粒跑動，表面覆蓋少量糞草料後壓平，後將瓶內外壁和瓶口擦淨，塞棉塞。
（3）滅菌 高壓滅菌，以0.152兆帕壓力保持2～2.5小時。蘑菇菌種的培養料滅菌不宜常壓滅菌（表1）。
表1 蒸氣壓力與溫度的關係
蘑菇二級種（原種）、三級種（栽培種）通常是採用糞草培養基和麥粒培養基。二級種以750毫升菌種瓶為容器。三級種以菌瓶或菌袋為容器。為確保菌種生長髮育良好，在培養基選料和配製上必須把握好以下事項：
（1）拌料①按配方的比例稱取所需原料，把蔗糖溶入水中，預溼發酵麥稈（稻草）和發酵牛糞粉，把麥皮、碳酸鈣撒入，反覆攪拌均勻，至含水量62%～65%。
②將麥粒稱量，浸泡或水煮至熟透無白心，拌入牛糞粉10%，碳酸鈣2%。
（2）裝瓶（袋）
①把配製好的糞草培養料裝入750毫升的菌種瓶中，料裝至瓶肩，後壓實，表面按平，裝料後將瓶內外壁和瓶口擦淨，塞棉塞。菌種袋常用15釐米×30釐米規格柱形袋，袋口有套環和棉塞，二級種菌瓶（袋）中部不打穴，三級種中心可打穴。
②把配製好的麥粒牛糞培養料裝入750毫升的菌種瓶中，料裝至瓶肩，後壓實，有的為防止菌瓶中麥粒跑動，表面覆蓋少量糞草料後壓平，後將瓶內外壁和瓶口擦淨，塞棉塞。
（3）滅菌 高壓滅菌，以0.152兆帕壓力保持2～2.5小時。蘑菇菌種的培養料滅菌不宜常壓滅菌（表1）。
表1 蒸氣壓力與溫度的關係