（1）母種製作
組織分離法簡單易行，後代變異小，能保菌株的優良特性，它是生產上常用的菌種分離法。種菇應選擇外觀典型，大小適中，菌蓋表面鱗片較少，顏色純白無病蟲害的頭潮菇，採摘種菇應在雞腿菇生長的棒狀後期或梭形前期。
母種培養基可選擇PDA培養基，也可用如下配方：小麥600克，鮮子實體100克，葡萄糖20克，蛋白腖3克，磷酸二氫鉀0.5克，磷酸氫二鉀1克，硫酸鎂1克，硫酸鈣1克，瓊脂25克，水1000 毫升。母種培養基的製作過程及無菌分離技術同其它食用菌制種技術，不再介紹。
（2）原種製作
雞腿菇原種製作多采用麥粒種，其配製方法如下：麥粒浸泡24小時左右，至麥粒露白，用清水沖洗後煮沸20～25分鐘，撈出瀝乾水後加1%石膏粉，20%已粉碎的麥稈發酵料，然後裝瓶，、無菌接種與培養。此配方菌絲生長旺盛，生長速度快，在25℃環境下750毫升菌種瓶12-15天可長滿瓶。
（3）栽培種的製作
雞腿菇栽培種培養基多用棉殼、麥稈發酵料配製。配方如下：麥稈牛糞發酵料33%、麩皮10 %、棉籽皮50%、玉米粉5%、石灰2%。先將麥稈粉碎中加牛糞20%-30%，加石膏2%，堆積發酵5-6天，然後加入其它原料，發酵48小時即可裝袋，無菌接種與培養。此配方比單純用發酵料及單純用棉籽皮有發酵快、菌絲壯的優點
（1）母種製作
組織分離法簡單易行，後代變異小，能保菌株的優良特性，它是生產上常用的菌種分離法。種菇應選擇外觀典型，大小適中，菌蓋表面鱗片較少，顏色純白無病蟲害的頭潮菇，採摘種菇應在雞腿菇生長的棒狀後期或梭形前期。
母種培養基可選擇PDA培養基，也可用如下配方：小麥600克，鮮子實體100克，葡萄糖20克，蛋白腖3克，磷酸二氫鉀0.5克，磷酸氫二鉀1克，硫酸鎂1克，硫酸鈣1克，瓊脂25克，水1000 毫升。母種培養基的製作過程及無菌分離技術同其它食用菌制種技術，不再介紹。
（2）原種製作
雞腿菇原種製作多采用麥粒種，其配製方法如下：麥粒浸泡24小時左右，至麥粒露白，用清水沖洗後煮沸20～25分鐘，撈出瀝乾水後加1%石膏粉，20%已粉碎的麥稈發酵料，然後裝瓶，、無菌接種與培養。此配方菌絲生長旺盛，生長速度快，在25℃環境下750毫升菌種瓶12-15天可長滿瓶。
（3）栽培種的製作
雞腿菇栽培種培養基多用棉殼、麥稈發酵料配製。配方如下：麥稈牛糞發酵料33%、麩皮10 %、棉籽皮50%、玉米粉5%、石灰2%。先將麥稈粉碎中加牛糞20%-30%，加石膏2%，堆積發酵5-6天，然後加入其它原料，發酵48小時即可裝袋，無菌接種與培養。此配方比單純用發酵料及單純用棉籽皮有發酵快、菌絲壯的優點