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  • 1 # 學海無涯苦作舟888

    一、血球計數板法的基本操作步驟:

    1、製備菌懸液:要進行稀釋;

    2、清洗血細胞計數板:先用自來水沖洗,然後吹乾或自然風乾;

    3、鏡檢計數室:分別在低倍鏡和高倍鏡下進行觀察有無汙物;

    4、加菌液:應先蓋好蓋玻片,然後吸取少量搖勻的菌液;

    5、顯微鏡計數:靜置5分鐘,在高倍鏡下,開始計數,統計2—4個小室,並取平均值。通常選取計數 室25格中的5格,即四角和中;

    6、清洗:鏡檢,清洗計數板,洗完後吹乾或自行晾乾。

    二、計算所測定細胞的個數

    (一)計數規格:

    1、大方格中有25箇中方格,每個中方格有16個小方格

    (1)小方格總數:25×16=400個;

    (2)選用5箇中方格,每個中方格有16個小方格,即80個小方格;

    (3)1ml樣品中菌含量=80個小方格內的細胞數/80×400×10ⁿ(n=4)×稀釋倍數

    2、一個大方格分成16箇中方格,每個中方格有25個小方格

    (1)小方格總數:16×25=400個

    (2)選用4箇中方格,每個中方格有25個小方格,即100個小方格;

    (3)1ml樣品中菌含量=100個小方格內的細胞數/100×400×10ⁿ(n=4)×稀釋倍數

    (二)計數容積=每個大方格面積(1㎜²)×蓋玻片與板間距離(0.1㎜)=0.1㎜³

    即一個大方格容積0.1㎜³要變成1ml要乘以10ⁿ(n=4)

    (三)計數原則:記相鄰兩邊及頂角

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