一、血球計數板法的基本操作步驟:
1、製備菌懸液:要進行稀釋;
2、清洗血細胞計數板:先用自來水沖洗,然後吹乾或自然風乾;
3、鏡檢計數室:分別在低倍鏡和高倍鏡下進行觀察有無汙物;
4、加菌液:應先蓋好蓋玻片,然後吸取少量搖勻的菌液;
5、顯微鏡計數:靜置5分鐘,在高倍鏡下,開始計數,統計2—4個小室,並取平均值。通常選取計數 室25格中的5格,即四角和中;
6、清洗:鏡檢,清洗計數板,洗完後吹乾或自行晾乾。
二、計算所測定細胞的個數
(一)計數規格:
1、大方格中有25箇中方格,每個中方格有16個小方格
(1)小方格總數:25×16=400個;
(2)選用5箇中方格,每個中方格有16個小方格,即80個小方格;
(3)1ml樣品中菌含量=80個小方格內的細胞數/80×400×10ⁿ(n=4)×稀釋倍數
2、一個大方格分成16箇中方格,每個中方格有25個小方格
(1)小方格總數:16×25=400個
(2)選用4箇中方格,每個中方格有25個小方格,即100個小方格;
(3)1ml樣品中菌含量=100個小方格內的細胞數/100×400×10ⁿ(n=4)×稀釋倍數
(二)計數容積=每個大方格面積(1㎜²)×蓋玻片與板間距離(0.1㎜)=0.1㎜³
即一個大方格容積0.1㎜³要變成1ml要乘以10ⁿ(n=4)
(三)計數原則:記相鄰兩邊及頂角
一、血球計數板法的基本操作步驟:
1、製備菌懸液:要進行稀釋;
2、清洗血細胞計數板:先用自來水沖洗,然後吹乾或自然風乾;
3、鏡檢計數室:分別在低倍鏡和高倍鏡下進行觀察有無汙物;
4、加菌液:應先蓋好蓋玻片,然後吸取少量搖勻的菌液;
5、顯微鏡計數:靜置5分鐘,在高倍鏡下,開始計數,統計2—4個小室,並取平均值。通常選取計數 室25格中的5格,即四角和中;
6、清洗:鏡檢,清洗計數板,洗完後吹乾或自行晾乾。
二、計算所測定細胞的個數
(一)計數規格:
1、大方格中有25箇中方格,每個中方格有16個小方格
(1)小方格總數:25×16=400個;
(2)選用5箇中方格,每個中方格有16個小方格,即80個小方格;
(3)1ml樣品中菌含量=80個小方格內的細胞數/80×400×10ⁿ(n=4)×稀釋倍數
2、一個大方格分成16箇中方格,每個中方格有25個小方格
(1)小方格總數:16×25=400個
(2)選用4箇中方格,每個中方格有25個小方格,即100個小方格;
(3)1ml樣品中菌含量=100個小方格內的細胞數/100×400×10ⁿ(n=4)×稀釋倍數
(二)計數容積=每個大方格面積(1㎜²)×蓋玻片與板間距離(0.1㎜)=0.1㎜³
即一個大方格容積0.1㎜³要變成1ml要乘以10ⁿ(n=4)
(三)計數原則:記相鄰兩邊及頂角