如果你手上有比較大量的純度比較高的蛋白質的話。可以嘗試用以下比較直接的方法:
1. isothermal titration calorimetry (ITC),直接測定兩個蛋白互相作用的Kd值。
2. AUC,也就是超速離心分析。可以直接測定兩個蛋白相互作用與否。
3.SAXS, 也就是X-ray小角散亂。不過技術難度比較大一些。
4. 溶液NMR,這個應該可以但不太瞭解。
5. 結晶再解構,這個不用解釋了。比較究極一點。
6.cryo-EM,同上。比較究級的方法。
7. 最簡單常用的,gel-filtration,觀察有沒有oligomer的分子量峰出現。但是相互作用弱的話很難觀測到。
8.更簡單常用的nativePAGE,同上,相互作用弱則很難觀測到。
9.用氨基架橋試劑共價連線,然後SDS-PAGE。看看有沒有oligomer的帶。暫時想到這些,跨度比較大。
如果你手上有比較大量的純度比較高的蛋白質的話。可以嘗試用以下比較直接的方法:
1. isothermal titration calorimetry (ITC),直接測定兩個蛋白互相作用的Kd值。
2. AUC,也就是超速離心分析。可以直接測定兩個蛋白相互作用與否。
3.SAXS, 也就是X-ray小角散亂。不過技術難度比較大一些。
4. 溶液NMR,這個應該可以但不太瞭解。
5. 結晶再解構,這個不用解釋了。比較究極一點。
6.cryo-EM,同上。比較究級的方法。
7. 最簡單常用的,gel-filtration,觀察有沒有oligomer的分子量峰出現。但是相互作用弱的話很難觀測到。
8.更簡單常用的nativePAGE,同上,相互作用弱則很難觀測到。
9.用氨基架橋試劑共價連線,然後SDS-PAGE。看看有沒有oligomer的帶。暫時想到這些,跨度比較大。