液-液色譜有正相和反相之分。如果採用極性固定相和相對非極性流動相，就稱為正相；如果採用相對非極性固定相和極性流動相，則稱為反相。由於極性化合物更容易被極性固定相所保留，所以正相液-液色譜系統一般可用於分離極性化合物。相反，反相液-液色譜系統一般可用於分離非極性或弱極性化合物。反相色譜過度到正相色譜需注意很多問題，過度溶劑分別為水，甲醇，異丙醇，20倍柱體積衝柱子，用相應溶劑洗進樣口和柱塞杆。

反相色譜原理是利用非極性的反相介質為固定相，極性有機溶劑的水溶液為流動相，根據溶質極性(疏水性)的差別進行溶質分離與純化的洗脫色譜法。與HIC一樣，RPC中溶質也透過疏水性相互作用分配於固定相表面，但是，RPC固定相表面完全被非極性基團所覆蓋，表現出強烈的疏水性。

因此，必須用極性有機溶劑(如甲醇、乙腈等)或其水溶液進行溶質的洗脫分離

正相色譜：分離水溶性或極性較大的成分如生物鹼、苷類、糖類、有機酸等化合物時，固定相多采用強極性溶劑，如水、緩衝溶液等，流動相則用氯仿、乙酸乙醋、丁醇等弱極性有機溶劑，稱之為正相色譜；反相色譜：但當分離脂溶性化合物,如高階脂肪酸、油脂、遊離甾體等時，則兩相可以顛倒,固定相可用石蠟油，而流動相則用水或甲醇等強極性溶劑，故稱之為反相分配色譜 (reverse phase partition chromatography)。

反相色譜是一反普通氣相色譜的測定方式。以被測的高分子為固定相、以惰性氣體為流動相，為了測定需要，在流動相中加入一些探針分子，它們是揮發性的低分子。將探針分子注入氣化室氣化後，由載氣帶入色譜柱，測定它們在兩相中的分配，從而研究高分產的各種性質，高分子與探針分子的相互作用以及高分子與高分子間的相互作用。

根據流動相和固定相相對極性不同，液相色譜分為正相色譜和反相色譜。流動相極性大於固定相極性的情況，稱為反相色譜。非極性鍵合相色譜可作反相色譜。在現代液相色譜中應用最廣泛，現代液相色譜分析工作的70%以上是在非極性鍵合固定相上進行的。

中文名——反相色譜

原理——溶質極性的差別進行分離與純化

運用領域——生物大分子分離

固定相——非極性的反相介質