探究pH對酶活影響，是瞭解不同pH條件下，酶催化底物反應速度的差異，因此需要將酶與底物混合，不混合，酶怎麼催化底物反應呢！酶不與底物混合在不同pH條件下放置，是瞭解酶在不同pH條件下的穩定性，因為酶的活力是隨著存放時間的延長逐漸損失的，合適的pH下儲存時間長，不合適的條件下儲存時間段。

溫度同樣有上述兩種情況，一是溫度對酶活力的影響（酶與底物混合），二是溫度對酶的穩定性的影響（酶不與底物混合）。

至於用什麼試劑與你測定的酶相關，不同的酶用不同的方法。溫度肯定影響酶的活性。

儘量在酶與底物接觸前調整好，因為酶具有高效性，混合後再調整，調整過程中會有大量反應，影響實驗結果。

①兩種強酸混合 : 先求c(H＋)混，再求pH。 ②兩種強鹼混合 : 先求c(OH－)混，再利用Kw求出c(H＋)混，最後求出pH。 例如 : PH=1和PH=5的鹽酸等體積混合，c(H+)=(0.1+1*10^-5)/2=0.1/2 pH=-lg(0.1/2)=1+lg2=1+0.3=1.3 由於lg2=0.3，因為PH=5的鹽酸的鹽酸中氫離子的濃度<