回覆列表
-
1 # 使用者5321751588965
-
2 # 使用者5769215406
測序引物分自帶引物和通用引物，自帶引物為客戶自行設計的PCR擴增引物或者載體及目的片段上設計的引物進行測序.通用引物一般在購買載體時公司提供，一般測序引物如T7、SP6、M13等測序公司免費使用.
-
3 # w無塵w
以t載體為培養基,雙酶消化t載體,凝膠執行檢測能清晰地看到酶消化產物,並有特異性回收。
通用引物：一般是指某基因外圍保守序列.雖然這個基因可能是序列多變的,（如同功酶）,但兩側翼序列則是保守的.利用倆側翼保守序列設計出來的引物,稱為通用引物.
有M13、T7、T3、Sp6
如果是需要把一個特定的基因片段擴增後，插入到載體上構建質粒，則要根據載體上多克隆位點帶有的酶切位點，在自己的目標基因片段上下游都分別設計一段序列，並在設計的序列中引入載體上的酶切位點。
這個時候設計出來，用於完成PCR擴增，並能夠在目標序列上下游都引入酶切位點的兩段序列就叫做質粒構建引物。這樣擴增獲得的目標片段兩端就帶有了酶切位點，經過酶切後，與同樣經過酶切的載體就可以連到一起，形成環狀，完成質粒的構建。