測定微生物計數的方法有很多,主要有以下幾種：

1. 血細胞計數法

2. 將稀釋的菌液樣品滴在血細胞計數板上,在顯微鏡下計算4~5箇中格的細菌數,並求出每個小格所含細菌的平均數,再以此為依據,估算總菌數.

3. ①此法的缺點是不能區分死菌和活菌.

4. ②對壓在小方格界線上的細菌,應當取平均值計數.

5. ③此法可用於測定培養液中酵母菌種群數量的變化

6. 2.稀釋塗布平板法

7. 原理：每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以透過生長形成菌落.培養基表面生長的一個菌落,來源於樣品稀釋液中的一個活菌.

8. ①這一方法常用來統計樣品中活菌的數目

9. ②統計的菌落數往往比活菌的實際數目低,原因是當兩個活多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落.因此統計結果一般用菌落數而不是用活菌數來表示.

10. ③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含細菌、酵母、芽孢與孢子等的數量均可用此法測定.但不適於測定樣品中絲狀體微生物,例如放線菌或絲狀真菌或絲狀藍細菌等的營養體等.

11. ④此法若不培養成菌落,可透過將一定量的菌液均勻地塗布在玻片上的一定面積上,經固定染色後在顯微鏡下計數,這樣又稱塗片計數法.染色可用臺盼藍,臺盼藍能使死細胞染成藍色,可分別計數死細胞和活細胞.

12. 3.濾膜法

13. 濾膜法是當樣品中菌數很低時,可將一定體積的湖水、海水或飲用水燈樣品透過膜過濾器.然後將濾膜乾燥、染色,並經處理使膜透明,再在顯微鏡下計算膜上（或一定面積上）的細菌數.

14. 此法也可以透過培養觀察形成的菌落數來推算樣品中的菌數.例如測定飲用水中大腸桿菌的數目：將已知體積的水過濾後,將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養.在該培養基上大腸桿菌的菌落呈現黑色,可根據培養基上黑色菌落的數目,計算出水樣中大腸桿菌的數目.

15. 此法也是統計樣品中活菌的數目.

16. 4.比濁法

17. 原理是在一定範圍內,菌是懸液中細胞濃度與混濁度成正比,即與光密度成正比,菌越多,光密度越大.因此可藉助與分光光度計,在一定波長下,測定菌懸液的光密度,以光密度表示菌量.實驗測量時一定要控制在菌濃度與光密度成正比的線性範圍內,否則不準確.

18. 5.顯微鏡直接計數法

19. 在課本生物選修1生物技術實踐P22中“除了上述活菌計數法外,顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法.”這裡說的顯微鏡直接計數,我認

測定微生物數量的方法

(1)直接計數法：常用的是顯微鏡直接計數。

(2)間接計數法：常用的是稀釋塗布平板計數法。

利用血球計數板在顯微鏡下直接計數，是一種常用的微生物計數方法。此法的優點是直觀、快速。將經過適當稀釋的菌懸液（或孢子懸液）放在血球計數板載玻片與蓋玻片之間的計數室中，在顯微鏡下進行計數。由於計數室的容積是一定的（ 0．1mm2），所以可以根據在顯微鏡下觀察到的微生物數目來換算成單位體積內的微生物總數目。由於此法計得的是活菌體和死菌體的總和，故又稱為總菌計數法。