PDA培養基的配製及試管斜面製作
1.實驗材料
1.1試劑材料
土豆,葡萄糖,瓊脂,試管,試管架,天平,注射用硫酸鏈黴素,注射用青黴素鈉,三角瓶,滅菌鍋,電磁爐,超淨工作臺,燒杯,1mL移液器,培養皿
1.2PDA培養基配方
土豆(去皮)200g
葡萄糖20g
瓊脂15-20g
蒸餾水1000mL
pH 自然
2.實驗方法與步驟
2.1稱量和熬煮
將土豆去皮,按自己所需的量(例如配製1L)稱取土豆,將土豆切成小塊放入鍋內,加入適量的蒸餾水,在電磁爐上加熱至沸騰,30min後用4層紗布在大量杯上過濾,棄掉濾渣,濾液用蒸餾水補足1L。
2.2溶解
用天平稱取20g葡萄糖加入濾液中,用玻璃棒攪拌,使其完全溶解。
2.3分裝
稱取8-10g瓊脂,加入所用三角瓶中,然後將濾液分裝到三角瓶中,每瓶500mL,用玻璃棒將瓊脂攪勻。
2.4加棉塞
培養基分裝完畢後,在三角瓶口上塞上棉塞,以阻止外界微生物進入培養基內造成汙染,並保證有良好的通氣性。
2.5包紮
加塞後,在棉塞外用兩層報紙包裹,其外用橡皮筋包紮好,標記。
2.6滅菌
將配製完成的培養基,包好的平板及其他所需用品一起放入滅菌鍋滅菌(見滅菌鍋使用方法)。
3.試管斜面製作方法與步驟
3.1前兩步同2.1,2.1步驟
3.2加熱溶解
量取500mL濾液到1000mL的燒杯中,再加入8-10g的瓊脂,用玻璃棒攪勻,放入微波爐緩慢加熱溶解,加熱其間注意不要讓培養基溢位燒杯,不時用玻璃棒攪拌。
3.3分裝
等瓊脂溶解後,將培養基分裝到事先準備好的試管中。分裝量約佔試管高度的1/4,管口儘量不要沾染培養基。
3.4加塞
培養基分裝完畢後,在試管口上塞上棉塞或橡膠塞,以阻止外界微生物進入培養基內造成汙染,並保證有良好的通氣性。
3.5包紮
加塞後,試管7-9支捆用橡皮筋捆好,在塞外用兩層報紙包裹,其外用橡皮筋包紮好,標記。
3.6滅菌
將包好的試管和其他所需滅菌物品一同放入滅菌鍋滅菌。
3.7擺斜面
滅菌完成後,將試管拿出,在超淨工作臺下襬成斜面,根據自己需要選擇合適的傾斜度。
PDA培養基的配製及試管斜面製作
1.實驗材料
1.1試劑材料
土豆,葡萄糖,瓊脂,試管,試管架,天平,注射用硫酸鏈黴素,注射用青黴素鈉,三角瓶,滅菌鍋,電磁爐,超淨工作臺,燒杯,1mL移液器,培養皿
1.2PDA培養基配方
土豆(去皮)200g
葡萄糖20g
瓊脂15-20g
蒸餾水1000mL
pH 自然
2.實驗方法與步驟
2.1稱量和熬煮
將土豆去皮,按自己所需的量(例如配製1L)稱取土豆,將土豆切成小塊放入鍋內,加入適量的蒸餾水,在電磁爐上加熱至沸騰,30min後用4層紗布在大量杯上過濾,棄掉濾渣,濾液用蒸餾水補足1L。
2.2溶解
用天平稱取20g葡萄糖加入濾液中,用玻璃棒攪拌,使其完全溶解。
2.3分裝
稱取8-10g瓊脂,加入所用三角瓶中,然後將濾液分裝到三角瓶中,每瓶500mL,用玻璃棒將瓊脂攪勻。
2.4加棉塞
培養基分裝完畢後,在三角瓶口上塞上棉塞,以阻止外界微生物進入培養基內造成汙染,並保證有良好的通氣性。
2.5包紮
加塞後,在棉塞外用兩層報紙包裹,其外用橡皮筋包紮好,標記。
2.6滅菌
將配製完成的培養基,包好的平板及其他所需用品一起放入滅菌鍋滅菌(見滅菌鍋使用方法)。
3.試管斜面製作方法與步驟
3.1前兩步同2.1,2.1步驟
3.2加熱溶解
量取500mL濾液到1000mL的燒杯中,再加入8-10g的瓊脂,用玻璃棒攪勻,放入微波爐緩慢加熱溶解,加熱其間注意不要讓培養基溢位燒杯,不時用玻璃棒攪拌。
3.3分裝
等瓊脂溶解後,將培養基分裝到事先準備好的試管中。分裝量約佔試管高度的1/4,管口儘量不要沾染培養基。
3.4加塞
培養基分裝完畢後,在試管口上塞上棉塞或橡膠塞,以阻止外界微生物進入培養基內造成汙染,並保證有良好的通氣性。
3.5包紮
加塞後,試管7-9支捆用橡皮筋捆好,在塞外用兩層報紙包裹,其外用橡皮筋包紮好,標記。
3.6滅菌
將包好的試管和其他所需滅菌物品一同放入滅菌鍋滅菌。
3.7擺斜面
滅菌完成後,將試管拿出,在超淨工作臺下襬成斜面,根據自己需要選擇合適的傾斜度。