革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,具體操作方法是：

　　1）塗片固定。

　　2）草酸銨結晶紫染1分鐘。

　　3）自來水沖洗。

　　4）加碘液覆蓋塗面染約1分鐘。

　　5）水洗,用吸水紙吸去水分。

　　6）加95%酒精數滴,並輕輕搖動進行脫色,20秒後水洗,吸去水分。

　　7）蕃紅染色液（稀）染2分鐘後,自來水沖洗,乾燥,鏡檢。

結晶紫染色液(Crystal Violet Staining Solution)是一種組織或細胞染色時常用的可以把細胞核染成深紫色的染色液。用於革蘭氏染色。 結晶紫是一種鹼性染料，可以和細胞核中的DNA結合，從而產生細胞核染色。

革蘭染色屬於鹼性染料。常用的革蘭染色鹼性染料有結晶紫、碘液、丙酮或乙醇、番紅花水溶液。

革蘭氏染色法，是指細菌學中廣泛使用的一種重要的鑑別染色法，屬於復染法。

這種染色法是由丹麥醫生革蘭於1884年所發明，最初是用來鑑別肺炎球菌與克雷伯肺炎菌。革蘭染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟。未經染色的細菌，由於其與周圍環境折光率差別甚小，故在顯微鏡下極難區別。