鐵標準溶液：含鐵0.1mg/ml。
準確稱取0.8634g的NH4Fe(SO4)2•12H2O，置於燒杯中，加入20ml 1:1HCl和少量水,溶解後,定量地轉移至1升容量瓶中，以水稀釋之刻度，搖勻。
測定步驟
1．吸收曲線的製作和測量波長的選擇：
用吸量管吸取0.0，1.0mL鐵標準溶液，分別注入兩個50mL比色管中，各加入1mL鹽酸羥胺溶液，2mL鄰二氮菲，5mL NaAc，用水稀釋至刻度，搖勻。放置10min後，用1cm比色皿，以試劑空白（即0.0mL鐵標準溶液）為參比溶液，在440～560nm之間，每隔10nm測一次吸光度，在最大吸收峰附近，每隔5nm測定一次吸光度。在座標紙上，以波長λ為橫座標，吸光度A為縱座標，繪製A和λ關係的吸收曲線。從吸收曲線上選擇測定Fe的適宜波長，一般選用最大吸收波長λmax。
2．標準曲線的製作：
用移液管吸取100μg•mL-1鐵標準溶液10mL於100mL容量瓶中，加入2mL 2mol•L -1的HCl，用水稀釋至刻度，搖勻。此溶液每毫升含Fe 3+ 10μg。
在6個50mL比色管中，用吸量管分別加入0.0, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0 mL 10μg•mL -1鐵標準溶液，分別加入1mL鹽酸羥胺，2mL Phen，5mL NaAc溶液，每加一種試劑後搖勻。然後，用水稀釋至刻度，搖勻後放置10 min。用1cm比色皿，以試劑為空白（即0.0mL鐵標準溶液），在所選擇的波長下，測量各溶液的吸光度。以含鐵量為橫座標，吸光度A為縱座標，繪製標準曲線。用繪製的標準曲線，重新查出相應鐵濃度的吸光度，計算Fe 2+－Phen絡合物的摩爾吸光係數
3．試樣中鐵的測定
準確移取5mL樣液至50mL容量瓶後，加鹽酸羥胺2mL，Phen 2mL，1mol•L -1 NaAc 10mL，加水稀釋至刻度，搖勻。測量吸光度A。根據標準曲線求出試樣中鐵的含量（μg•mL -1）。
鐵標準溶液：含鐵0.1mg/ml。
準確稱取0.8634g的NH4Fe(SO4)2•12H2O，置於燒杯中，加入20ml 1:1HCl和少量水,溶解後,定量地轉移至1升容量瓶中，以水稀釋之刻度，搖勻。
測定步驟
1．吸收曲線的製作和測量波長的選擇：
用吸量管吸取0.0，1.0mL鐵標準溶液，分別注入兩個50mL比色管中，各加入1mL鹽酸羥胺溶液，2mL鄰二氮菲，5mL NaAc，用水稀釋至刻度，搖勻。放置10min後，用1cm比色皿，以試劑空白（即0.0mL鐵標準溶液）為參比溶液，在440～560nm之間，每隔10nm測一次吸光度，在最大吸收峰附近，每隔5nm測定一次吸光度。在座標紙上，以波長λ為橫座標，吸光度A為縱座標，繪製A和λ關係的吸收曲線。從吸收曲線上選擇測定Fe的適宜波長，一般選用最大吸收波長λmax。
2．標準曲線的製作：
用移液管吸取100μg•mL-1鐵標準溶液10mL於100mL容量瓶中，加入2mL 2mol•L -1的HCl，用水稀釋至刻度，搖勻。此溶液每毫升含Fe 3+ 10μg。
在6個50mL比色管中，用吸量管分別加入0.0, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0 mL 10μg•mL -1鐵標準溶液，分別加入1mL鹽酸羥胺，2mL Phen，5mL NaAc溶液，每加一種試劑後搖勻。然後，用水稀釋至刻度，搖勻後放置10 min。用1cm比色皿，以試劑為空白（即0.0mL鐵標準溶液），在所選擇的波長下，測量各溶液的吸光度。以含鐵量為橫座標，吸光度A為縱座標，繪製標準曲線。用繪製的標準曲線，重新查出相應鐵濃度的吸光度，計算Fe 2+－Phen絡合物的摩爾吸光係數
3．試樣中鐵的測定
準確移取5mL樣液至50mL容量瓶後，加鹽酸羥胺2mL，Phen 2mL，1mol•L -1 NaAc 10mL，加水稀釋至刻度，搖勻。測量吸光度A。根據標準曲線求出試樣中鐵的含量（μg•mL -1）。