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1 # 使用者6611625867495
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2 # 某生物公司研發總監
RT-PCR檢測RNA的,elisa和WB檢測蛋白的(抗原或者抗體)。elisa和WB相比,靈敏度高一些,特異性差一些。
對於HIV檢測,RT-PCR和elisa的靈敏度都很高,都適合初篩,不過也都有少量漏檢(往往並不重疊),推薦兩種方法各檢測一次。
Elisa檢測孕婦HIV,可能會有假陽性。RT-PCR不會。
透過調整cut-off,RT-PCR可以同時用於確診,起到和WB類似的作用。不過目前WB還是金標準。
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3 # 使用者7715875998885
realtime PCR可以做基因表達量,在RNA水平。
ELISA、WB、免疫組化,原理有些類似,都是用標記的抗體(抗原),去結合相應的抗原(抗體)。但是靈敏度有些不同,定量和定性的程度也有些不同。另外,免疫組化還可以定位某蛋白在組織或者細胞中的位置。
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4 # 使用者1247527146841
western blot只能根據和內參的灰度比較進行半定量,不能絕對定量。
western blot可以反映出分子量的資訊,western blot一般只能做到半定量,ELISA一般可以定量。
Western Blot是目前一種結合內參對蛋白質進行半定量的方法。
可操作性western blot一次處理量就是一塊膠版,10-20個樣品最多了。
western blot操作常見的缺點為非特異性條帶,膜本底差,顯色不好等。
根據實際效果來看,一般來講蛋白量控制在2~5微克Western-blot顯印的效果比較好。上樣量太少可能顯印不出來(WB理論檢測限是皮克級),上樣量太大顯印後可能面積太大顏色過深,對判斷可能會有帶來幹擾。