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1 # 兵器知識yjz
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2 # 停子的生活日記
DNA濃溶液的粘稠度很高(長鏈DNA尤甚),如果有機械剪下力極容易打斷溶液中的DNA分子。
RNA酶能迅速降解任何型別的RNA。更糟的是,RNA酶廣泛存在於人的體表、體液、分泌物、其他生物和空氣中,所以RNA酶的汙染是提取RNA的大敵。
實際操作中
提取基因組DNA時操作必須輕柔,如需混勻液體,只能用緩慢滾轉的方法進行,切勿振盪或用手彈。
提取RNA時更需要小心,戴新的塑膠手套和口罩,在滅過菌的操作檯進行,使用的加樣槍頭、EP管和水都必須用DEPC(焦碳酸二乙酯)處理過,最後的RNA沉澱用DEPC水溶解。
RNA剪下酶是催化RNA分子進行剪下反應的核酸類酶。
(1)核酸酶有DNase、RNase、核酸酶S1等,可水解相應的DNA和RNA,核酸酶S1可降解單鏈DNA和RNA,用量增大也可降解雙鏈核酸。它可用於切去ds-cDNA合成中產生的髮夾環。
(2)修飾酶有些酶可在其他酶的作用下,將酶的結構進行共價修飾,使該酶活性發生改變,核酶的催化功能與其空間結構有密切關係。
不同的核酶可分為兩類:1 剪下型核酶:只剪不接,如M1 RNA。2 剪接型核酶:該酶具有序列特異的內切核酸酶、RNA連線酶等多種酶活性。加工場所在生物體細胞質(或相關實驗裝置中)。