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總糖的測定(直接滴定法)
滴定, 蒸餾水, 葡萄糖, 酒石酸, 試劑
斐林氏試劑
甲液:稱取15g硫酸銅(CuSO4·5H2O)及0.05g次甲基蘭,用蒸餾水溶解。移入1000mL棕色容量瓶中,用蒸餾水定容。
乙液:稱取50g酒石酸鉀鈉,75g氫氧化鈉及4g亞鐵氰化鉀,用蒸餾水溶解,移入1000mL容量瓶中,用蒸餾水定容。
斐林氏溶液的標定:吸取斐林氏甲液和乙液各5mL於150mL三角瓶中加水10ml,從滴定管中滴加約9.5mL葡萄糖標準溶液控制在2min內加熱至沸,趁沸以1滴/2s的速度滴加葡萄糖標準溶液。滴定至藍色退盡為終點。記錄消耗葡萄糖標準溶液的總體積。同時平行操作三份,取其平均值計算第10mL(甲乙液各5mL)鹼性酒石酸銅溶液相當於葡萄糖的質量(mg)。
A=W*V/1000
式中:
A——10ml斐林氏甲乙液,相當於葡萄糖克數,g;
W——稱取葡萄糖克數,g;
V——滴定時所消耗葡萄糖的毫升數,mL;
1000——葡萄糖的稀釋倍數。
滴定度的計算公式:TB/A=mA/VB。下標B/A中B指標液,A指被測物,mA指被測物質A的質量,VB指滴定相應mA質量的A所用的標準溶液B的體積。