人、鼠細胞融合實驗分三步進行∶
首先用熒光染料標記抗體∶將小鼠的抗體與發綠色熒光的熒光素(fluorescin)結合,人的抗體與發紅色熒光的羅丹明(rhodamine)結合;
第二步是將小鼠細胞和人細胞在滅活的仙台病毒的誘導下進行融合;
最後一步將標記的抗體加入到融合的人、鼠細胞中,讓這些標記抗體同融合細胞膜上相應的抗原結合。
開始,融合的細胞一半是紅色,一半是綠色。在37℃下40分鐘後,兩種顏色的熒光在融合的雜種細胞表面呈均勻分佈,這說明抗原蛋白在膜平面內經擴散運動而重新分佈。這種過程不需要ATP。如果將對照實驗的融合細胞置於低溫(1℃)下培育,則抗原蛋白基本停止運動。這一實驗結果令人信服地證明了膜整合蛋白的側向擴散運動。
標記點的是熒游標記的蛋白,這樣顯微鏡下能看到。
如果在一個細胞內同時看這兩種蛋白,表示融合成功了。
人、鼠細胞融合實驗分三步進行∶
首先用熒光染料標記抗體∶將小鼠的抗體與發綠色熒光的熒光素(fluorescin)結合,人的抗體與發紅色熒光的羅丹明(rhodamine)結合;
第二步是將小鼠細胞和人細胞在滅活的仙台病毒的誘導下進行融合;
最後一步將標記的抗體加入到融合的人、鼠細胞中,讓這些標記抗體同融合細胞膜上相應的抗原結合。
開始,融合的細胞一半是紅色,一半是綠色。在37℃下40分鐘後,兩種顏色的熒光在融合的雜種細胞表面呈均勻分佈,這說明抗原蛋白在膜平面內經擴散運動而重新分佈。這種過程不需要ATP。如果將對照實驗的融合細胞置於低溫(1℃)下培育,則抗原蛋白基本停止運動。這一實驗結果令人信服地證明了膜整合蛋白的側向擴散運動。