短乳桿菌菌種用mrs培養基培養活化後，離心收集菌體，用生理鹽水稀釋製成菌體濃度為108-109個/ml的菌懸液。取菌懸液10ml加入硫酸二乙酯誘變溶液5ml，混勻，37℃、200r/min誘變15min，再加入硫代硫酸鈉溶液5ml終止反應，離心收集菌體，用生理鹽水洗滌3次後再稀釋製成菌懸液，在距離15w紫外燈15cm處照射90s，即得誘變菌液。
所述mrs培養基，配方是蛋白腖10.0g，牛肉浸膏10.0g，酵母粉5.0g，葡萄糖5.0g，乙酸鈉5.0g，檸檬酸二胺2.0g，吐溫801.0g，磷酸氫二鉀2.0g，七水硫酸鎂0.2g，七水硫酸錳0.05g，蒸餾水1.0l，固體mrs培養基還需加入20g瓊脂；
所述離心的條件是4℃，5000r/min離心10min；
所述硫酸二乙酯誘變溶液中硫酸二乙酯的含量是2%；
所述硫代硫酸鈉溶液中硫代硫酸鈉的含量是25%；
②篩選高產gaba的短乳桿菌菌株
初篩：將誘變菌液用生理鹽水稀釋，接種到固體mrs培養基中，30℃培養72h，計算致死率。復篩：挑取生長較快的菌落，接種到液體mrs培養基中，30℃培養48h，離心收集菌體，用等體積緩衝溶液稀釋，30℃培養24h。離心取上清液，檢測gaba的含量，選取高產菌株。
所述致死率的計算公式是相同稀釋濃度條件下，(誘變前的菌落總數-誘變後的菌落總數)/誘變前的菌落總數×100%；
所述離心的條件是4℃，5000r/min，離心10min；
所述緩衝溶液是含有20g/l穀氨酸，1g/l吐溫80，ph4.5的乙酸-乙酸鈉緩衝溶液；
所述檢測gaba含量的檢測方法是berthelot比色法。
採用本方法來進行誘變，短乳桿菌誘變致死率在80%-90%之間，使用的誘變劑價格低廉、易獲取，同時誘變效率較高，複合誘變之後篩選出的短乳桿菌菌株gaba產量可以提升50%以上，增產效果明顯。
與現有技術相比較，本發明誘變得到的高產gaba短乳桿菌菌種，具有以下顯著特點：
（1）本發明所使用的材料易獲取，成本低，方法也簡單易行。
（2）利用該方法進行復合誘變育種，篩選出的短乳桿菌菌株gaba的產量可以提升50%以上，並且gaba的高產性狀穩定。
（3）本發明的篩選條件溫和，以穀氨酸作為唯一的轉化底物，緩衝溶液成分簡單，gaba提純結晶方便，gaba的提純純度也有保證。
（4）本發明透過berthelot比色法分析轉化液中gaba轉化率的高低，篩選效率較高。
實施例1：
①複合誘變育種
②篩選高產γ-氨基丁酸（γ-aminobutyricacid，gaba）的短乳桿菌菌株
利用當前發明進行的誘變育種短乳桿菌致死率為87%，篩選出的短乳桿菌的gaba產量為23.85g/l，gaba產量提高了55.46%。
實施例2：
利用當前發明進行的誘變育種短乳桿菌致死率為84%，篩選出的短乳桿菌gaba產量為25.36g/l，gaba產量提高了65.36%。
實施例3：
利用當前發明進行的誘變育種短乳桿菌致死率為89%，篩選出的短乳桿菌gaba產量為26.12g/l，gaba產量提高了170.31%。
短乳桿菌菌種用mrs培養基培養活化後，離心收集菌體，用生理鹽水稀釋製成菌體濃度為108-109個/ml的菌懸液。取菌懸液10ml加入硫酸二乙酯誘變溶液5ml，混勻，37℃、200r/min誘變15min，再加入硫代硫酸鈉溶液5ml終止反應，離心收集菌體，用生理鹽水洗滌3次後再稀釋製成菌懸液，在距離15w紫外燈15cm處照射90s，即得誘變菌液。
所述mrs培養基，配方是蛋白腖10.0g，牛肉浸膏10.0g，酵母粉5.0g，葡萄糖5.0g，乙酸鈉5.0g，檸檬酸二胺2.0g，吐溫801.0g，磷酸氫二鉀2.0g，七水硫酸鎂0.2g，七水硫酸錳0.05g，蒸餾水1.0l，固體mrs培養基還需加入20g瓊脂；
所述離心的條件是4℃，5000r/min離心10min；
所述硫酸二乙酯誘變溶液中硫酸二乙酯的含量是2%；
所述硫代硫酸鈉溶液中硫代硫酸鈉的含量是25%；
②篩選高產gaba的短乳桿菌菌株
初篩：將誘變菌液用生理鹽水稀釋，接種到固體mrs培養基中，30℃培養72h，計算致死率。復篩：挑取生長較快的菌落，接種到液體mrs培養基中，30℃培養48h，離心收集菌體，用等體積緩衝溶液稀釋，30℃培養24h。離心取上清液，檢測gaba的含量，選取高產菌株。
所述mrs培養基，配方是蛋白腖10.0g，牛肉浸膏10.0g，酵母粉5.0g，葡萄糖5.0g，乙酸鈉5.0g，檸檬酸二胺2.0g，吐溫801.0g，磷酸氫二鉀2.0g，七水硫酸鎂0.2g，七水硫酸錳0.05g，蒸餾水1.0l，固體mrs培養基還需加入20g瓊脂；
所述致死率的計算公式是相同稀釋濃度條件下，(誘變前的菌落總數-誘變後的菌落總數)/誘變前的菌落總數×100%；
所述離心的條件是4℃，5000r/min，離心10min；
所述緩衝溶液是含有20g/l穀氨酸，1g/l吐溫80，ph4.5的乙酸-乙酸鈉緩衝溶液；
所述檢測gaba含量的檢測方法是berthelot比色法。
採用本方法來進行誘變，短乳桿菌誘變致死率在80%-90%之間，使用的誘變劑價格低廉、易獲取，同時誘變效率較高，複合誘變之後篩選出的短乳桿菌菌株gaba產量可以提升50%以上，增產效果明顯。
與現有技術相比較，本發明誘變得到的高產gaba短乳桿菌菌種，具有以下顯著特點：
（1）本發明所使用的材料易獲取，成本低，方法也簡單易行。
（2）利用該方法進行復合誘變育種，篩選出的短乳桿菌菌株gaba的產量可以提升50%以上，並且gaba的高產性狀穩定。
（3）本發明的篩選條件溫和，以穀氨酸作為唯一的轉化底物，緩衝溶液成分簡單，gaba提純結晶方便，gaba的提純純度也有保證。
（4）本發明透過berthelot比色法分析轉化液中gaba轉化率的高低，篩選效率較高。
實施例1：
①複合誘變育種
短乳桿菌菌種用mrs培養基培養活化後，離心收集菌體，用生理鹽水稀釋製成菌體濃度為108-109個/ml的菌懸液。取菌懸液10ml加入硫酸二乙酯誘變溶液5ml，混勻，37℃、200r/min誘變15min，再加入硫代硫酸鈉溶液5ml終止反應，離心收集菌體，用生理鹽水洗滌3次後再稀釋製成菌懸液，在距離15w紫外燈15cm處照射90s，即得誘變菌液。
所述mrs培養基，配方是蛋白腖10.0g，牛肉浸膏10.0g，酵母粉5.0g，葡萄糖5.0g，乙酸鈉5.0g，檸檬酸二胺2.0g，吐溫801.0g，磷酸氫二鉀2.0g，七水硫酸鎂0.2g，七水硫酸錳0.05g，蒸餾水1.0l，固體mrs培養基還需加入20g瓊脂；
所述離心的條件是4℃，5000r/min離心10min；
所述硫酸二乙酯誘變溶液中硫酸二乙酯的含量是2%；
所述硫代硫酸鈉溶液中硫代硫酸鈉的含量是25%；
②篩選高產γ-氨基丁酸（γ-aminobutyricacid，gaba）的短乳桿菌菌株
初篩：將誘變菌液用生理鹽水稀釋，接種到固體mrs培養基中，30℃培養72h，計算致死率。復篩：挑取生長較快的菌落，接種到液體mrs培養基中，30℃培養48h，離心收集菌體，用等體積緩衝溶液稀釋，30℃培養24h。離心取上清液，檢測gaba的含量，選取高產菌株。
所述mrs培養基，配方是蛋白腖10.0g，牛肉浸膏10.0g，酵母粉5.0g，葡萄糖5.0g，乙酸鈉5.0g，檸檬酸二胺2.0g，吐溫801.0g，磷酸氫二鉀2.0g，七水硫酸鎂0.2g，七水硫酸錳0.05g，蒸餾水1.0l，固體mrs培養基還需加入20g瓊脂；
所述致死率的計算公式是相同稀釋濃度條件下，(誘變前的菌落總數-誘變後的菌落總數)/誘變前的菌落總數×100%；
所述離心的條件是4℃，5000r/min，離心10min；
所述緩衝溶液是含有20g/l穀氨酸，1g/l吐溫80，ph4.5的乙酸-乙酸鈉緩衝溶液；
所述檢測gaba含量的檢測方法是berthelot比色法。
利用當前發明進行的誘變育種短乳桿菌致死率為87%，篩選出的短乳桿菌的gaba產量為23.85g/l，gaba產量提高了55.46%。
實施例2：
①複合誘變育種
短乳桿菌菌種用mrs培養基培養活化後，離心收集菌體，用生理鹽水稀釋製成菌體濃度為108-109個/ml的菌懸液。取菌懸液10ml加入硫酸二乙酯誘變溶液5ml，混勻，37℃、200r/min誘變15min，再加入硫代硫酸鈉溶液5ml終止反應，離心收集菌體，用生理鹽水洗滌3次後再稀釋製成菌懸液，在距離15w紫外燈15cm處照射90s，即得誘變菌液。
所述mrs培養基，配方是蛋白腖10.0g，牛肉浸膏10.0g，酵母粉5.0g，葡萄糖5.0g，乙酸鈉5.0g，檸檬酸二胺2.0g，吐溫801.0g，磷酸氫二鉀2.0g，七水硫酸鎂0.2g，七水硫酸錳0.05g，蒸餾水1.0l，固體mrs培養基還需加入20g瓊脂；
所述離心的條件是4℃，5000r/min離心10min；
所述硫酸二乙酯誘變溶液中硫酸二乙酯的含量是2%；
所述硫代硫酸鈉溶液中硫代硫酸鈉的含量是25%；
②篩選高產gaba的短乳桿菌菌株
初篩：將誘變菌液用生理鹽水稀釋，接種到固體mrs培養基中，30℃培養72h，計算致死率。復篩：挑取生長較快的菌落，接種到液體mrs培養基中，30℃培養48h，離心收集菌體，用等體積緩衝溶液稀釋，30℃培養24h。離心取上清液，檢測gaba的含量，選取高產菌株。
所述mrs培養基，配方是蛋白腖10.0g，牛肉浸膏10.0g，酵母粉5.0g，葡萄糖5.0g，乙酸鈉5.0g，檸檬酸二胺2.0g，吐溫801.0g，磷酸氫二鉀2.0g，七水硫酸鎂0.2g，七水硫酸錳0.05g，蒸餾水1.0l，固體mrs培養基還需加入20g瓊脂；
所述致死率的計算公式是相同稀釋濃度條件下，(誘變前的菌落總數-誘變後的菌落總數)/誘變前的菌落總數×100%；
所述離心的條件是4℃，5000r/min，離心10min；
所述緩衝溶液是含有20g/l穀氨酸，1g/l吐溫80，ph4.5的乙酸-乙酸鈉緩衝溶液；
所述檢測gaba含量的檢測方法是berthelot比色法。
利用當前發明進行的誘變育種短乳桿菌致死率為84%，篩選出的短乳桿菌gaba產量為25.36g/l，gaba產量提高了65.36%。
實施例3：
①複合誘變育種
短乳桿菌菌種用mrs培養基培養活化後，離心收集菌體，用生理鹽水稀釋製成菌體濃度為108-109個/ml的菌懸液。取菌懸液10ml加入硫酸二乙酯誘變溶液5ml，混勻，37℃、200r/min誘變15min，再加入硫代硫酸鈉溶液5ml終止反應，離心收集菌體，用生理鹽水洗滌3次後再稀釋製成菌懸液，在距離15w紫外燈15cm處照射90s，即得誘變菌液。
所述mrs培養基，配方是蛋白腖10.0g，牛肉浸膏10.0g，酵母粉5.0g，葡萄糖5.0g，乙酸鈉5.0g，檸檬酸二胺2.0g，吐溫801.0g，磷酸氫二鉀2.0g，七水硫酸鎂0.2g，七水硫酸錳0.05g，蒸餾水1.0l，固體mrs培養基還需加入20g瓊脂；
所述離心的條件是4℃，5000r/min離心10min；
所述硫酸二乙酯誘變溶液中硫酸二乙酯的含量是2%；
所述硫代硫酸鈉溶液中硫代硫酸鈉的含量是25%；
②篩選高產gaba的短乳桿菌菌株
初篩：將誘變菌液用生理鹽水稀釋，接種到固體mrs培養基中，30℃培養72h，計算致死率。復篩：挑取生長較快的菌落，接種到液體mrs培養基中，30℃培養48h，離心收集菌體，用等體積緩衝溶液稀釋，30℃培養24h。離心取上清液，檢測gaba的含量，選取高產菌株。
所述mrs培養基，配方是蛋白腖10.0g，牛肉浸膏10.0g，酵母粉5.0g，葡萄糖5.0g，乙酸鈉5.0g，檸檬酸二胺2.0g，吐溫801.0g，磷酸氫二鉀2.0g，七水硫酸鎂0.2g，七水硫酸錳0.05g，蒸餾水1.0l，固體mrs培養基還需加入20g瓊脂；
所述致死率的計算公式是相同稀釋濃度條件下，(誘變前的菌落總數-誘變後的菌落總數)/誘變前的菌落總數×100%；
所述離心的條件是4℃，5000r/min，離心10min；
所述緩衝溶液是含有20g/l穀氨酸，1g/l吐溫80，ph4.5的乙酸-乙酸鈉緩衝溶液；
所述檢測gaba含量的檢測方法是berthelot比色法。
利用當前發明進行的誘變育種短乳桿菌致死率為89%，篩選出的短乳桿菌gaba產量為26.12g/l，gaba產量提高了170.31%。