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  • 1 # 大堯的媽媽

    1. 理論基礎(原理):細胞全能性

    全能性表達的難易程度:受精卵>生殖細胞>幹細胞>體細胞;植物細胞>動物細胞

    2. 植物組織培養技術

    (1)過程:離體的植物器官、組織或細胞→愈傷組織→試管苗→植物體

    (2)用途:微型繁殖、作物脫毒、製造人工種子、單倍體育種、細胞產物的工廠化生產。

    (3)地位:是培育轉基因植物、植物體細胞雜交培育植物新品種的最後一道工序。

    動物細胞工程

    1. 動物細胞培養

    (1)概念:動物細胞培養就是從動物機體中取出相關的組織,將它分散成單個細胞,然後放在適宜的培養基中,讓這些細胞生長和繁殖。

    (2)動物細胞培養的流程:

    取動物組織塊(動物胚胎或幼齡動物的器官或組織)→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→製成細胞懸液→轉入培養瓶中進行原代培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續傳代培養。

    (3)細胞貼壁和接觸抑制:

    懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細胞貼壁。

    細胞數目不斷增多,當貼壁細胞分裂生長到表面相互抑制時,細胞就會停止分裂增殖,這種現象稱為細胞的接觸抑制。

    (4)動物細胞培養需要滿足以下條件

    ①無菌、無毒的環境:

    培養液應進行無菌處理。

    通常還要在培養液中新增一定量的抗生素,以防培養過程中的汙染。

    此外,應定期更換培養液,防止代謝產物積累對細胞自身造成危害。

    ②營養:合成培養基成分:糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。

    ③溫度:適宜溫度:哺乳動物多是36.5℃+0.5℃;pH:7.2~7.4。

    ④氣體環境:95%空氣+5%CO2。O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養液的pH。

    (5)動物細胞培養技術的應用:

    製備病毒疫苗、製備單克隆抗體、檢測有毒物質、培養醫學研究的各種細胞。

    2. 動物體細胞核移植技術和克隆動物

    (1)哺乳動物核移植可以分為胚胎細胞核移植(比較容易)和體細胞核移植(比較難)。

    (2)選用去核卵(母)細胞的原因:

    卵(母)細胞比較大,容易操作;卵(母)細胞細胞質多,營養豐富。

    卵細胞的細胞質可使體細胞細胞核全能性得到表達。

    (3)體細胞核移植的大致過程是:

    (4)體細胞核移植技術的應用:

    ①加速家畜遺傳改良程序,促進良畜群繁育;

    ②保護瀕危物種,增大存活數量;

    ③生產珍貴的醫用蛋白;

    ④作為異種移植的供體;

    ⑤用於組織器官的移植等。

    (5)體細胞核移植技術存在的問題:克隆動物存在著健康問題、表現出遺傳和生理缺陷等。

    3. 動物細胞融合

    (1)動物細胞融合也稱細胞雜交,是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。

    融合後形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳資訊的單核細胞,稱為雜交細胞。

    (2)動物細胞融合與植物原生質體融合的原理基本相同,誘導動物細胞融合的方法與植物原生質體融合的方法類似,常用的誘導因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等。

    (3)動物細胞融合的意義:

    克服了遠緣雜交的不親和性,成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物生物新品種培育的重要手段。

    4. 單克隆抗體

    (1)抗體:一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。從血清中分離出的抗體產量低、純度低、特異性差。

    (2)單克隆抗體的製備過程:

    兩次篩選:第一次篩選出雜交瘤細胞,第二次篩選出能產生特異性抗體的雜交瘤細胞。

    (3)雜交瘤細胞的特點:既能大量繁殖,又能產生專一的抗體。

    (4)單克隆抗體的優點:特異性強,靈敏度高,並能大量製備。

    (5)在腹腔內增殖的優點:不需要特定的培養基,不需要嚴格的外界條件。

    (6)篩選的時候用:特定的選擇性培養基進行篩選。

    (5)單克隆抗體的作用:

    ①作為診斷試劑:準確識別各種抗原物質的細微差異,並跟一定抗原發生特異性結合,具有準確、高效、簡易、快速的優點。

    ②用於治療疾病和運載藥物:

    主要用於治療癌症治療,可製成“生物導彈”(藉助單克隆抗體的導向作用),也有少量用於治療其它疾病。

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