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1 # 使用者1772056458827283
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2 # 飄逸的風鈴26285375
SOB培養基(SOB Medium)是分子生物學常用的大腸桿菌培養基,與LB培養基相比,SOB培養基中含有兩倍多蛋白腖,蛋白腖中富含氨基酸及多肽。另外,SOB培養基中含有鎂離子,鎂離子是高密度培養必須的離子。利用SOB培養基培養大腸桿菌在普通條件(250rpm)下搖瓶培養,菌濃可達到OD600 3-5左右,如果提高轉速到350 rpm, OD600最高能夠達到10-15。在SOB培養基中的大腸桿菌具有更高的轉化效率,因此常用SOB培養基製備感受態細胞。SOB培養基也用來配製SOC培養基。
SOB培養基配方如下:
2.0% 胰蛋白腖(Tryptone)
0.5% 酵母提取物(Yeast Extract)
10mM 氯化鈉 (Sodium chloride)
2.5mM氯化鉀(Potassium Chloride)
10mM 氯化鎂(magnesium chloride)
10mM 硫酸鎂 (Magnesium Sulfate)
瞭解了SOB培養基的相關用途和基本配製方法後,我們來看一下SOC培養基的相關知識。
SOC培養基(SOC Medium)也是分子生物學中常用的培養基,用於製備高效率的大腸桿菌感受態細胞,也用於熱激後感受態細胞的復甦。
SOC培養基配方如下:
0% 胰蛋白腖(Tryptone)
0.5% 酵母提取物(Yeast Extract)
10mM 氯化鈉 (Sodium chloride)
2.5mM氯化鉀(Potassium Chloride)
10mM 氯化鎂(magnesium chloride)
10mM 硫酸鎂 (Magnesium Sulfate)
20mM 葡萄糖(Glucose)
SOC培養基跟SOB培養基的唯一區別是SOC中包含有20 mM葡萄糖(glucose)。培養基中的葡萄糖充當分解代謝抑制物(catabolite repressor)。大腸桿菌更傾向應用葡萄糖作為碳源。因此在葡萄糖存在的情況下,其他的碳源的分解就會被抑制。在20 mM 葡萄糖存在下,乳糖不會被代謝,乳糖操縱子被抑制,外源基因不會發生表達,這就減少了外源基因表達給細胞帶來的生長壓力。因此,利用SOC培養基進行轉化反應時,熱激後細胞生長的速率會比LB培養基中高出很多。
LB培養基是一種培養基的名稱,生化分子實驗中一般用該培養基來預培養菌種,使菌種成倍擴增,達到使用要求。也可用於培養基因工程受體菌(大腸桿菌)。可分為液體培養基和固體培養基。LB一般被解釋為Luria-Bertani培養基,然而根據其發明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani)的說法,這個名字來源於英語的lysogeny broth,即溶菌肉湯。
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LB培養基是通常所說的肉湯培養基,SOB的英文來源是SuperOptimalBroth,大概的意思是最佳化肉湯培養基。兩者基本都是肉湯培養基,而SOB營養成分更好些。