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1 # 使用者3728402101594
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2 # 手機使用者23955036187
固定是組織處理最重要的一步,也是在整個製片過程中最無法補救的一步。所謂“固定”,就是組織離體後,用各
種辦法使其細胞內的物質儘可能接近其生活狀態時的形態結構和位置的過程。固定的目的是為了防止組織、細胞自溶與
腐敗,防止細胞內酶對蛋白質的分解作用,使細胞內的各種成分如蛋白質抗原、脂肪、碳水化合物或酶類轉變為不溶性
物質,以保持原有的結構與生活時相仿,還要最大程度地儲存抗原、
DNA
等物質。另外,組織固定後,具有硬化作用,
增加了組織的韌性,
有利於取材和組織脫水。
如果標本沒有及時固定或固定不恰當,
組織已經自溶或腐敗,
將無法逆轉。
固定的注意事項:
(
1
)
固定必須及時:
組織離體後,
必須在
1
小時內放入
4%
中性緩衝甲醛液內固定,
有特殊要求的組織如胃癌檢測
Her2
應在
30
分鐘內放入
4%
中性緩衝甲醛液內固定。
(
2
)固定液的選擇:
4%
中性緩衝甲醛液。
(
3
)固定液的
pH
:
7.0
。
(
4
)固定液的量:必須大於組織體積的
4-10
倍。
(
5
)固定液的濃度:濃度必須準確,過稀或過濃都會影響組織的形態和固定的效果。
(
6
)固定液的質量:發現固定液變質,如甲醛液體產生白色沉澱,應立即更換。
(
7
)固定的時間:新鮮標本,應該剖開固定
12-24
小時後再取材。大標本取材後在室溫下還需再固定
4-6
小時,小標
本取材後應該在室溫下再固定
3-4
小時,如果是新鮮小標本取材,必須再固定
4-8
小時。如果室內溫度低,固定時間還
需延長。
(
8
)固定的溫度:最好固定於室溫,如時間不夠,可放於
35-45
℃的全封閉組織處理機內,溫度過高,會加快組織的自
溶和組織的過度收縮,加溫可破壞細胞內的抗原。
(
9
)固定液的滲透速度:
4%
中性緩衝甲醛液
3-5mm/24
小時。
(
10
)需要做免疫組化或分子病理的標本,從標本離體至組織脫水開始,總固定時間一般不要超過
48
小時,同時也不
要少於
24
小時(厚度
2-3mm
)。
在中國,組織固定是病理切片質量存在問題的最主要原因:
1
、固定不及時,手術醫生將標本離體後不及時固定。
2
、沒有剖開固定。
3
、固定液量不足(包括固定容器太小)。
4
、沒有用規範的固定液。
5
、固定時間不夠,有的病理科為了使病理報告儘快出來而縮短了固定時間。
沒有充分的固定,就不可能取好材,不可能有優質的
HE
切片,也不可能有好的免疫組化和分子病理結果,因此,唯
一能解決這個問題只有靠病理科自己,建議各醫院病理科應該有專業標本處置人員:將手術室的標本新鮮切下後在半小
時內直接送至病理科,由病理科專業人員剖開、加入足量的固定液。只有這樣,才能真正將組織固定工作做好。
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3 # 曦少少
組織固定是指在組織病理學中為了能防止細菌的腐蝕和組織的自溶,儲存細胞固有的物質,能凝固或沉澱細胞內或組織液,糖原等,使細胞或組織基本上保持與生活時的物質一樣,使組織硬化,便於切塊,就都必須進行及時的適當的和有效的固定。
回覆列表
組織固定是指將各種組織浸入防腐劑內,使細胞內的物質為不溶性。